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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
MagStrep® Strep-Tactin®XT beads
- 供应商:
IBA Lifesciences
- 规格:
2ml(2-5090-002)/10ml(2-5090-010)/50ml(2-5090-050)
| 规格: | 2ml(2-5090-002) | 产品价格: | 询价 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 10ml(2-5090-010) | 产品价格: | 询价 |
| 规格: | 50ml(2-5090-050) | 产品价格: | 询价 |
MagStrep® Strep-Tactin®XT 磁珠可用于通过批量(Batch)或高通量模式纯化带有 Strep 标签的融合蛋白。
针对细胞纯化,我们提供直径更小(1 µm)的特定磁珠;而对于 BioID(近邻标记技术)靶点,我们建议使用我们的 MagStrep® Strep-Tactin® 磁珠。
由于采用了琼脂糖表面设计,且 Strep-Tactin®XT 对 Strep 标签具有极高的特异性,MagStrep® Strep-Tactin®XT 磁珠表现出极低的非特异性蛋白结合。这确保了卓越的靶蛋白纯度,使其成为蛋白质分离以及通过 Pull-down(免疫共沉淀/拉网实验) 进行复合物鉴定的理想工具。MagStrep® Strep-Tactin®XT 磁珠既适用于反应管中的快速小量纯化,也适用于 96 孔板操作。
使用磁力分离器可以轻松快捷地分离磁珠。这消除了离心步骤,并将洗涤过程中扰动沉淀或磁珠流失的风险降至为零。靶蛋白或复合物的洗脱可以在温和条件下使用含生物素的 Buffer BXT 进行,也可以通过在 SDS 上样缓冲液中煮沸进行变性洗脱。
Specifications
| Bead Size: | 30 µm (average) |
|---|---|
| Form: | 5% suspension |
| Possible Application: | Protein purification of Strep-tag®II and Twin-Strep-tag® fusion proteins |
| Specificity: | Strep-tag®II and Twin-Strep-tag® |
| Support: | 6% agarose, crosslinked, spherical magnetic beads |
| Twin-Strep-tag® Binding Capacity: | 42.5 µg/µl |
Shipping information
| Storage: | 2-8 °C |
|---|---|
| Stability: | 12 months after shipping |
| Shipping: | Room temperature |
MagStrep® Strep-Tactin®XT 磁珠有三种规格:2 ml、10 ml、50 ml


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的「身份」。Pull-down 较 Co-IP 的优点在于,不仅能证实靶蛋白的直接相互作用,且洗脱条件也很温和,保留蛋白质结构与天然蛋白复合体的同时,又避免将非特异性结合的蛋白质共同洗脱下来,确保了后续分析的准确性。这一优点在 Strep-tag 技术中充分体现。图 12 为应用 MagStrep「type3」XT 磁珠进行蛋白质 Strep pull-down 步骤图。 图 12:Strep pull-down 互作蛋白质分析示意图。A:Strep-Tactin®XT 包被磁珠;B:固定
Expi Supernatant 进行培养。 纯化过程中,选择柱体积为 0.2 ml 的三种纯化柱:Ni Sepharose 6 FastFlow, Ni Sepharose Excel, 和 Strep-Tactin®XT 4Flow®。 分别用其纯化 60CV (column volume, 柱体积) 和 120CV 的样品,并保持上样样品中的蛋白质含量在纯化柱最大结合载量 80%-95 %。 二、实验结果 01 对比蛋白质回收效率 对于不同的填料,可以从洗脱组分中回
-tag® 系统对各宿主表达系统的适用情况较为理想。根据其纯化原理,酸性 pH 和有力的氨基酸不会影响 Strep-标签蛋白与纯化树脂的结合(前文也曾提到,此系统的耐受 pH 范围为 4~10)。而哺乳动物细胞培养基中存在的生物素需要注意,但实际上无需过多担心。因为其可通过添加适当封闭液进行封闭,且在 Twin-Strep-tag®: Strep-Tactin® XT 系统中不会产生影响。如果考虑使用 His-tag 在酵母、昆虫或哺乳动物细胞中表达蛋白,在成本考量上还需加入后续的实验步骤,根据情况
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