- ￥200
- 开泰
- AO4102
- 2026年01月28日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
| AO4102 | TOP10感受态细胞 | 20×100μL | 200 |
■ 产品优势
● 高转化效率：>1x108 cfu/µg pUC19 DNA
● 适用于高效的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传
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文献和实验本月旧帖整理活动专题: T-A克隆技术 大家可以在以下基础上进行整理或对具体问题进行讨论 (1)如何筛选合适的宿主菌株 ◇ 所选的宿主菌株应对所用质粒的抗生素抗性基因敏感。 ◇ 如进行蓝/白斑筛选，宿主菌β-半乳糖苷酶的α-肽编码区应在染色体或附加体上缺失掉（lacZΔΜ15）。TOP10和DH5α都能用于蓝/白斑筛选。 ◇ 要表达重组蛋白，可使用带有可诱导的T7 RNA聚合酶基因的菌株，如BL21（DE3）。 ◇ 使用pGEM载体克隆大片段时（>7-8 kb），经转化
4℃，14000r/m离心10min。 7.12 弃上清，空气中干燥。 7.13 10μl H2O悬浮细胞。8、转化（要求：4℃预冷） 8.1 冰上融化感受态细胞（感受态细胞的制备见分子克隆啦）Top10f’。 8.2 加100μl转化细胞到预冷的1.5ml离心管中，枪头轻轻吹打混匀。 8.3 冰上孵育30min。 8.4 42℃，45S～50S。 8.5 冰上孵育2min后，加1ml LB。 8.6 37℃，1h，250r/m. 8.7 2500r/m
. 7.13 10μl H2O悬浮细胞. 8、转化(要求:4℃预冷) 8.1 冰上融化感受态细胞(感受态细胞的制备见分子克隆啦)Top10f’. 8.2 加100μl转化细胞到预冷的1.5ml离心管中,枪头轻轻吹打混匀. 8.3 冰上孵育30min. 8.4 42℃,45S～50S. 8.5 冰上孵育2min后,加1ml LB. 8.6 37℃,1h,250r/m. 8.7 2500r/m
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