- ￥560
- 碧云天（beyotime）
- P0033
- 中国
- 2026年01月26日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
现货
- 英文名：
Membrane and Cytosol Protein Extraction Ki
- 保质期：
1年
- 供应商：
柏莱源（天津）生物科技有限公司
- 保存条件：
-20度冻存
- 规格：
100次
产品简介：
碧云天的细胞膜蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒(Membrane and Cytosol Protein Extraction Kit)提供了一种比较简单、方便地从培养细胞或组织中抽提细胞膜蛋白和细胞浆蛋白的方法。抽提的膜蛋白不仅包括质膜上的膜蛋白，也包括线粒体膜、内质网膜和高尔基体膜等上的膜蛋白。
保存条件：
-20℃保存，一年有效。
使用说明：
1. 准备试剂：室温融解并混匀膜蛋白抽提试剂A和B，融解后立即置于冰浴上。取适量的膜蛋白抽提试剂A和B备用，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
2. 准备细胞或组织样品：
a. 对于细胞
(1) 收集细胞
对于贴壁细胞：培养约2000-5000万细胞，用PBS洗一遍，用细胞刮子刮下细胞或用含有EDTA但不含胰酶的细胞消化液处理细胞使细胞不再贴壁很紧，并用移液器吹打下细胞。离心收集细胞，吸除上清，留下细胞沉淀备用。尽量避免用胰酶消化细胞，以免胰酶降解需抽提的目的膜蛋白。
对于悬浮细胞：培养约2000-5000万细胞，直接离心收集细胞，吸除上清，留下细胞沉淀备用。
(2) 洗涤细胞：用适量冰浴预冷的PBS轻轻重悬细胞沉淀，取少量细胞用于计数，剩余细胞4℃，600g离心5分钟沉淀细胞。弃上清，随后4℃，600g离心1分钟，以沉淀离心管管壁上的残留液体并进一步沉淀细胞，尽最大努力吸尽残留液体。
(3) 细胞预处理：把1毫升临用前添加了PMSF的膜蛋白抽提试剂A加入至2000-5000万细胞中，轻轻并充分悬浮细胞，冰浴放置10-15分钟。
b. 对于组织：
取约100毫克组织，用剪刀尽量小心剪切成细小的组织碎片。加入1毫升临用前添加了PMSF的膜蛋白抽提试剂A，轻轻悬浮组织碎片，冰浴放置10-15分钟。注：如果组织样品比较少，也可以使用更少的组织量，例如30-50mg，后续试剂的用量及操作步骤不变；组织用量较少时，最后获得的膜蛋白也较少。
3. 细胞或组织样品的破碎及破碎效果的鉴定：把细胞悬液或组织样品转移到一适当大小的冰浴预冷玻璃匀浆器中，匀浆约30-50下。匀浆效果与细胞类型和组织类型相关，不同细胞或组织所需的匀浆次数有所不同，需自行优化。通常可以在匀浆30次后取约2-3微升细胞或组织匀浆液滴在盖玻片上并在显微镜下观察，如见细胞核周晕环(A shiny ring around the nuclei)或完整的细胞形态，说明细胞仍完整。如果有70-80%的细胞均无核周晕环和完整细胞形态，说明细胞已经充分破碎，则进行下一步实验。否则，重新匀浆10-30次直到细胞至少70%已经破碎。同时记录对于该细胞的匀浆次数，通常在后续实验时不必再摸索匀浆次数。另外需注意特定的匀浆次数和匀浆器也有关，需同时注意记录使用的是哪一个匀浆器。
注：如果没有适当的玻璃匀浆器，对于培养的细胞也可以采用冻融法来破碎细胞。把步骤2中的样品在液氮和室温依次反复冻融两次，然后取少量样品在显微镜下检测细胞破碎的程度。如果细胞破碎的程度不足70%，可增加冻融次数，直到细胞破碎的程度大于70%。
4. 去除细胞核和未破碎的细胞：4℃，700g离心10分钟，小心收集上清液至一新的离心管中。吸取上清时切勿接触沉淀！可以有约30-50微升上清液残留不予吸取，以保证吸取的上清液有较高的纯度。
5. 沉淀细胞膜碎片：4℃，14000g离心30分钟，以沉淀细胞膜碎片。
6. 收集细胞浆蛋白：吸取上清即为细胞浆蛋白，可-70℃保存备用。吸取上清时可以有30-50微升上清残留，以避免接触沉淀导致上清样品被污染。每5000万细胞使用本产品裂解可获得5-30mg细胞浆蛋白, 不同细胞有所不同。
7. 抽提膜蛋白：4℃，14000g离心10秒，尽最大努力吸尽上清。可以轻轻触碰到沉淀，甚至吸走很少量的沉淀。加入膜蛋白抽提试剂B 200微升(如有必要，也可以加大到300微升)，最高速剧烈Vortex 5秒重悬沉淀，冰浴5-10分钟。重复前述步骤的vortex和冰浴孵育1-2次，以充分抽提膜蛋白。随后，4℃，14000g离心5分钟，收集上清即为细胞膜蛋白溶液。可-70℃保存备用。对于一些有特殊用途的膜蛋白，可自行配制适当的膜蛋白抽提试剂进行膜蛋白抽提。每5000万细胞使用本产品裂解可获得0.3-3mg细胞膜蛋白, 不同细胞有所不同。
| 产品编号 | 产品名称 | 产品包装 |
| P0033 | 细胞膜蛋白与细胞浆蛋白提取试剂盒 | 100次 |
细胞膜蛋白与细胞浆蛋白提取试剂盒代理：柏莱源（天津）生物科技有限公司
我司代理品牌及优势品牌包含但不限于：sigma、Thermo Fisher、Goldbio、Qiagen、Abcam、ATCC、ECACC、Polysciences、艾本德、天根、Takara、B&D、BIOFLUX、biolegend、R-Biopharm等。
柏莱源（天津）生物科技有限公司主要从事分子生物学、细胞生物学及免疫学实验相关试剂及耗材的销售，包括核酸提取、PCR产品、血清、细胞培养耗材等产品。
细胞膜蛋白与细胞浆蛋白提取试剂盒代理：柏莱源（天津）生物科技有限公司，更多碧云天产品资讯，请联系我们哦！
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验1. Hai-Liang Zhang, Bing-Xin Hu, Zhi-Ling Li, Tian Du, Jia-Lu Shan, Zhi-Peng Ye, Xiao-Dan Peng, Xuan Li, Yun Huang, Xian-Ying Zhu, Yu-Hong Chen, Gong-Kan Feng, Dajun Yang, Rong Deng, Xiao-Feng Zhu . PKCβII phosphorylates ACSL4 to amplify lipid peroxidation to induce ferroptosis Nat Cell Biol. 2022 Jan;24(1):88-98.doi: 10.1038/s41556-021-00818-3.(IF 20.042)
2. Zhang Y, Sun L, Xuan L, Pan Z, Hu X, Liu H, Bai Y, Jiao L, Li Z, Cui L, Wang X, Wang S, Yu T, Feng B, Guo Y, Liu Z, Meng W, Ren H, Zhu J, Zhao X, Yang C, Zhang Y, Xu C, Wang Z, Lu Y, Shan H, Yang B . Long non-coding RNA CCRR controls cardiac conduction via regulating intercellular coupling. Nat Commun. 2018 Oct 9;9(1):4176.(IF 12.121)
3. Bo Wang, Evangelia E Tsakiridis, Shuman Zhang, Andrea Llanos, Eric M Desjardins, Julian M Yabut, Alexander E Green, Emily A Day, Brennan K Smith, James S V Lally, Jianhan Wu, Amogelang R Raphenya, Krishna A Srinivasan, Andrew G McArthur, Shingo Kajimura, Jagdish Suresh Patel, Michael G Wade, Katherine M Morrison, Alison C Holloway, Gregory R Steinberg . The pesticide chlorpyrifos promotes obesity by inhibiting diet-induced thermogenesis in brown adipose tissue Nat Commun. 2021 Aug 27;12(1):5163.doi: 10.1038/s41467-021-25384-y.(IF 12.121)
4. Tang J, Guo YS, Zhang Y, Yu XL, Li L, Huang W, Li Y, Chen B, Jiang JL, Chen ZN. . CD147 induces UPR to inhibit apoptosis and chemosensitivity by increasing the transcription ofBip in hepatocellular carcinoma. Cell Death Differ. 2012 Nov;19(11):1779-90.(IF 10.717)
5. Zhang N, Li M, Sun X, Jia H, Liu W . NIR-responsive cancer cytomembrane-cloaked carrier-free nanosystems for highly efficient and self-targeted tumor drug delivery. Biomaterials. 2018 Mar;159:25-36.(IF 10.317)
6. Yan Gong, Ziqi Li, Shitian Zou, Daizhao Deng, Pinglin Lai, Hongling Hu, Yongzhou Yao, Le Hu, Sheng Zhang, Kai Li, Tiantian Wei, Xiaoyang Zhao, Guozhi Xiao, Zifeng Chen, Yu Jiang, Xiaochun Bai, Zhipeng Zou . Vangl2 limits chaperone-mediated autophagy to balance osteogenic differentiation in mesenchymal stem cells Dev Cell. 2021 Jul 26;56(14):2103-2120.e9.doi: 10.1016/j.devcel.2021.06.011.(IF 10.092)
7. Weixiang Bian, Mengfan Tang, Hua Jiang, Wenyan Xu, Wanyu Hao, Yue Sui, Yingnan Hou, Litong Nie, Huimin Zhang, Chao Wang, Nan Li, Jiadong Wang, Jun Qin, Lianfeng Wu, Xianjue Ma, Junjie Chen, Wenqi Wang, Xu Li . Low-density-lipoprotein-receptor-related protein 1 mediates Notch pathway activation Dev Cell. 2021 Oct 25;56(20):2902-2919.e8.doi: 10.1016/j.devcel.2021.09.015.(IF 10.092)
8. Hou L, Bao X, Zang C, Yang H, Sun F, Che Y, Wu X, Li S, Zhang D, Wang Q . Integrin CD11b mediates α-synuclein-induced activation of NADPH oxidase through a Rho-dependent pathway. Redox Biol. 2018 Apr;14:600-608.(IF 9.986)
9. Caiying Liu, Wan Sun, Tong Zhu, Si Shi, Jieping Zhang, Juan Wang, Furong Gao, Qingjian Ou, Caixia Jin, Jiao Li, Jing-Ying Xu, Jingfa Zhang, Haibin Tian, Guo-Tong Xu, Lixia Lu . Glia maturation factor-β induces ferroptosis by impairing chaperone-mediated autophagic degradation of ACSL4 in early diabetic retinopathy Redox Biol. 2022 Jun:52:102292.doi: 10.1016/j.redox.2022.102292.(IF 9.986)
10. Qiaoling Zhang, Hui Liang, Xuyang Zhao, Lin Zheng, Yunqiao Li, Jingjing Gong, Yizhang Zhu, Yan Jin, Yuxin Yin . PTENε suppresses tumor metastasis through regulation of filopodia formation EMBO J. 2021 May 17;40(10):e105806.doi: 10.15252/embj.2020105806.(IF 9.889)
细胞/细菌总 RNA 提取试剂盒操作指南（DP430） ——细菌
以下操作按照天根产品 DP430 细胞/细菌总 RNA 提取试剂盒的说明书进行，所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品，样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备：1. 细菌培养液，溶菌酶（RT401，客户自备，提取细菌总RNA时需配备。）2. 无水乙醇 ，β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器（DNase I配置），移液器及配套RNase-Free无菌枪头（200 μl ，1ml）1.5 ml，2.0ml 离心管（RNase-free）4. 通风橱 涡旋
trick 准备做关于PKC 活化从胞浆转位到膜上的WESTERN 由于是加细胞因子刺激，所以要收比较多的样品，如果要超离的话太麻烦了 不知道各位有没有不需要超离的提取液体的配方 由于先是做些预实验，暂时还不准备买试剂盒，但是如果大家有什么好的试剂盒也给推荐下吧:) licanming 我也需要做这个！但好像基本都是用超离和试剂盒做的！ andyyu
wyj2002 低氧诱导因子-1 是一种核转录因子，看到有些文献直接抽胞浆蛋白进行实验，请问有经验的朋友，是抽取胞浆蛋白还是核蛋白？先谢过了！ xhjggl 可以用胞浆蛋白和核蛋白提取试剂盒，确定其在胞浆和核中的的分布情况，也可能是在胞浆中合成再进入细胞核中的，上海生工就有这样的试剂盒卖。 细胞核蛋白/浆蛋白抽提试剂盒 Nuclear and Cytoplasmic Protein
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
