- ￥90
- 上海经科
- JK2455
- 2026年01月26日
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- 文献和实验
- 技术资料
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4℃,避光,12个月
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现货
- 供应商：
上海经科化学科技有限公司
- 规格：
100T
病理染色液
名称：AO/EB双荧光染色试剂盒
货号：JK2455
用途：检测细胞凋亡
储存条件：4℃,避光,12个月
组分：细胞死亡判断的生物化学方法,吖啶橙(AO)能透过活细胞膜,嵌入细胞核DNA,使之发出明亮的绿色荧光。溴乙锭(EB)仅能透过胞膜受损的细胞,嵌入核DNA,发红光。活细胞呈绿色荧光,死细胞呈橙色荧光。试剂盒主要有AO染色液、EB染色液组成。
产品简介：
细胞凋亡(Apoptosis)的检测方法有形态学、生物化学、DNA片段化检测方法以及TUNEL等标记片段化DNA方法，但从细胞凋亡概念产生的历史及准确性方面考虑，使用显微镜进行的形态学观察也是很重要的；细胞死亡的检测可以通过荧光色素染色区分活细胞、死细胞，测定细胞代谢活性和形态学观察，这些方法都是利用细胞凋亡这种情况进行测定的，因而不一定反映实际情况。
吖啶橙(Acridine Orange，AO)属于三环杂芳香染料，能透过胞膜完整的细胞，嵌入细胞核DNA，与双链DNA结合后发出绿色荧光，荧光发射峰为530nm；溴化乙锭(Ethidium Bromide，EB)仅能透过胞膜受损的细胞，嵌入核DNA发出橘红色荧光，荧光发射峰为610nm。染色后，凋亡细胞呈染色增强，荧光更为明亮，均匀一致的圆状或固缩状、团块状结构；非凋亡细胞核呈荧光深浅不一的结构样特征；二者很容易判别。在荧光显微镜下观察，可见四种细胞形态：活细胞(VN)，核染色质着绿色并呈正常结构；早期凋亡细胞(VA)，核染色质着绿色呈固缩状或圆珠状；晚期凋亡细胞(NVA)，核染色质为橘红色并呈固缩状或圆珠状；非凋亡的死亡细胞(NVN)，核染色质着橘红色并呈正常结构。本产品仅用于科研，不宜用于临床诊断或其他用途。
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文献和实验通用，尤其是在进行动态检查时。医琳师妹：我将我所作的方法与大家共享：吖啶橙/溴化乙锭双荧光染色测定PC12细胞凋亡（acridine orange/ethidium bromide, AO/EB）：（1）细胞爬片：在6孔培养板中预先置入玻璃盖玻片，接种细胞悬液，干预后，予95%乙醇固定15分钟，微干，然后准备荧光染色。将100mg/L溶于PBS的吖啶橙和100mg/L溶于PBS的溴化乙锭各5μl（临用前混合加入，加样量宜小，有时各2μl-5μl足够，量太大容易形成细胞凋亡的假阳性），在照相前混匀
化碳，条件稳定后（5%二氧化碳：5%氧气），将细胞置入培养，分别培养30分钟、1小时、2小时、3小时、6小时、12小时，取出细胞，将细胞吹打成细胞悬液，1000r/min离心30分钟，倾去上清，PBS洗涤一次，离心去上清后，迅速注入3ml 4℃70%的冷乙醇，边注入边振摇，同时反复通过7号针头的注射器抽打5次（或用振匀器振匀），以避免细胞成团，送流式细胞仪PI检测。 10、吖啶橙/溴化乙锭双荧光染色测定细胞凋亡（acridine orange/ethidium bromide, AO/EB）：（细胞
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