人 布鲁顿氏酪氨酸激酶 (1-659) 蛋白, 组氨酸 标签

4 种常用的蛋白纯化标签说明

蛋白纯化的方法很多，如层析法、电泳法、超离心法、超滤等，其中蛋白质亲和层析法通常只需要一步操作便能将目标蛋白从混合物中分离出来，且纯度很高，因而备受实验者的青睐。 在进行蛋白表达时，选择合适的标签有利于蛋白的纯化，促进蛋白的可溶性，因此了解几种常用的蛋白纯化标签很重要。一般来说，常用的蛋白纯化标签主要有 His tag、GST tag、MBP tag、NusA tag、Strep tag 等，那么这些蛋白纯化标签有什么不同之处呢? His tag(组氨酸标签) 融合蛋白是目前最常用的表达

常用蛋白标签、序列及特性

比例的带电残基（YPYDVPDYA），因此可能形成强烈的抗体识别位点。组氨酸（His）这是目前使用最广泛的纯化标签；它允许用镍亲和树脂进行纯化。这些树脂可耐受变性条件（可用于从包涵体中纯化变性溶解的蛋白质）并可重复使用。结合特异性低于抗体树脂，因此通常需要额外的纯化步骤。酸性洗脱已被用作咪唑的低盐替代物，钴可用于代替镍以提高特异性。金属蛋白和富含组氨酸的蛋白质（例如氯霉素乙酰转移酶）也与这些树脂结合，所以建议使用合适的对照。单纯疱疹病毒（HSV）HSV 来源于糖蛋白 D 前体包膜蛋白并且短

纯化新思路——构建双标签蛋白

你是否苦于你纯化的标签蛋白无法达到理想纯度而日夜发愁？是否在换了新的标签后仍不太满意而承受老板们鬼畜般的霹雳大吼？朋友别哭，相信这篇文章可以为你带来纯化高纯度蛋白的新思路。   进行蛋白质功能研究的关键在于得到高纯度蛋白。习惯于构建单标签的你想必遇到过杂质太多，蛋白表达量少甚至不稳定的情况。何不根据目的蛋白性质构建双标签蛋白进行两种不同亲和层析柱的纯化？没准会有意想不到的效果。 01双标签蛋白助力于目的蛋白的高特异性 单组氨酸标签蛋白的亲和层析结果通常不能保证杂蛋白的有效去除