人前列腺特异性膜抗原蛋白,组氨酸标签

对比 Strep-tag 与 His-tag 系统异同点？

得到所需的蛋白质，为目前所常用的技术方法。 His-tag系统有很高的蛋白产量(5–40 mg/ml resin)，但理想情况下的纯度约为80%左右。但如需在随后的分析中测量蛋白质的功能，就需要再进行更多的cleaning steps。 Strep-tag®系统一步纯化满足的纯度可达到95%，无需进行更多的纯化步骤即可直接进行蛋白的分析。产量数据为16 mg/ml。 深度对比Strep-tag®与His-tag系统 His-tag是以6个组氨酸残基组合的融合标签，其基于蛋白质表面的组氨酸残基侧链

聊一聊蛋白纯化都在讨论的质与量

是以 6 个组氨酸残基组合的融合标签，其基于蛋白质表面的组氨酸残基侧链，在中性和弱碱性条件下可以和固定化的金属离子相互作用（如 Ni 离子，Zn 离子，Co 离子等），从而达到纯化蛋白的目的。 此系统的洗脱方式可以用过三种非特异性步骤达成：① 降低 pH（4.5～6）；② 加入 EDTA；③ 不同浓度咪唑溶液（20～250 mM）。当蛋白洗脱完毕后，使用 EDTA 使纯化树脂与金属离子分离，即可完成树脂的再生。 Strep-tag® 则是基于链霉亲和素（Streptavidin）和生物素这一自然的相互

纯化新思路——构建双标签蛋白

你是否苦于你纯化的标签蛋白无法达到理想纯度而日夜发愁？是否在换了新的标签后仍不太满意而承受老板们鬼畜般的霹雳大吼？朋友别哭，相信这篇文章可以为你带来纯化高纯度蛋白的新思路。   进行蛋白质功能研究的关键在于得到高纯度蛋白。习惯于构建单标签的你想必遇到过杂质太多，蛋白表达量少甚至不稳定的情况。何不根据目的蛋白性质构建双标签蛋白进行两种不同亲和层析柱的纯化？没准会有意想不到的效果。 01双标签蛋白助力于目的蛋白的高特异性 单组氨酸标签蛋白的亲和层析结果通常不能保证杂蛋白的有效去除