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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20 °C
- 保质期:
1年
- 英文名:
HisX6
- 库存:
66
- 供应商:
子科生物
- 规格:
0.5毫克/1毫克
抗体的保存建议:
抗体保存得当与否直接决定了抗体的活性和使用效果。如果抗体保存得当,大部分抗体活性都可以维持数月甚至数年。请按照说明书或者抗体标签上推荐的保存条件正确保存抗体!无论是保存还是运输,绝对避免反复冻融抗体!
1、拿到抗体后请务必在1000-3000转离心1-2分钟后再打开管盖进行分装和保存!(由于运输过程中反复颠簸,管内微量抗体容易聚集在管盖处,一旦直接打开容易流失抗体。请放心抗体出厂时保证已装入足量。)
2、对于大部分抗体,比较合适的保存方式是分装后保存在-20℃冰箱。
▶分装可以最大程度降低反复冻融对抗体活性的损害,同时也降低了多次从同一管中吸取抗体造成污染的可能性。
▶分装的量以一次实验用完为好,但建议最少不要少于10μL每份。分装体积越小,抗体浓度可能会受到蒸发以及管壁吸附的影响,同时分装次数越多移液吸头吸附的抗体也越多,可能会误认为抗体没有足量装入。(最好用无菌的进口0.2ML离心管来分装抗体,国产的小管一般没有经过很好的硅化处理,容易吸附抗体蛋白,影响抗体活性。)
▶分装时请将无菌的微量移液器吸头先插入管底部反复吹打几次后再吸出抗体,以便抗体有效成分与抗体保护剂充分混匀。
▶复融后的分装抗体如果一次用不完,请将剩余母液保存在4℃冰箱,避免再冻起来!
▶绝对避免将抗体保存在自动除霜冰箱的冷藏室中。尽量将抗体保存在手动除霜冰箱里面,而不是在冰箱门上。
3、大部分抗体收到后4℃短暂保存1-2周对抗体活性是基本没有影响的。如果抗体很快(1-2周内)就能使用完,推荐在4℃保存,避免反复冻融对抗体活性的损害。如果要长期保存则分装后-20℃保存。
4、即用型抗体请务必保存在4℃冰箱,一定不能冷冻保存。
5、特殊抗体的保存:
▶酶联抗体:一般保存在4℃,尽量避免冷冻起来。否则可能会导致酶活力的下降或者丧失。
▶偶联抗体:所有偶联抗体需要4℃避光保存。尤其是荧光标记抗体,对光极为敏感,因此所有实验阶段也是要避光操作的。
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蛋白等) 可以完成一般方法很难完成的分离,如变性和非变性蛋白、功能不同的蛋白的分离 属于一种吸附层析,载量高,具有高效的捕获和浓缩作用。 基本步骤 亲和层析作为一种吸附性层析,主要步骤包括平衡、上样、清洗、洗脱和再平衡步骤 (图10)。由于亲和作用需要在特定的条件下结合和洗脱,亲和层析需要使用特定的结合缓冲液和洗脱缓冲液。 图10 亲和层析的基本步骤 适用性 带有标签的融合蛋白纯化,如His标签蛋白、GST标签蛋白等。 抗体及抗体片段的纯化 其他和某些配基有特异性结合作用的分子的纯化
干扰仍是个问题. 2001年, 覆盖了芽孢酵母大部份基因产物的大约6,000种蛋白质, 被表达并在N-末端以GST- HisX6(glutoahione S-转移酶-聚组氨酸)标记, 然后植入芯片. 这项工作是耶鲁大学的Snyder小组完成的(Science , 2001 , 293 , 2101-2105).通过光滑的玻璃表面上的醛基或Ni离子包裹(与HisX6成键)使蛋白质平滑地附到芯片之上. 平均分配的点入的蛋白质通过萤
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