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- 英文名:
Human BTK Protein, His Tag (active enzyme)
- 库存:
1///1
- 供应商:
ACROBiosystems
- 规格:
50ug/1mg
| 规格: | 50ug | 产品价格: | ¥3150.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 1mg | 产品价格: | ¥27300.0 |
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文献和实验液的 A280,选择 A280 变化明显的管取样进行 SDS-PAGE,分析组氨酸标签蛋白的分布。根据 A280 和电泳图选择合并 A280 相近的管,弃掉没有目的蛋白的管。目的蛋白的脱盐处理可以用透析,也可以超滤,还可以过分子筛。如果需要更大的蛋白浓度,可以使用超滤的办法 。收集的蛋白- 20℃ 保存。说明:只经过 Ni-NTA 纯化,所得蛋白一般不纯,往往混有杂蛋白。这时可以考虑进一步的纯化措施,比如 DEAE, 分子筛,疏水层析等。(二)若为包涵体表达所需特殊试剂:细胞裂解液:50 mM Tris
蛋白纯化的方法很多,如层析法、电泳法、超离心法、超滤等,其中蛋白质亲和层析法通常只需要一步操作便能将目标蛋白从混合物中分离出来,且纯度很高,因而备受实验者的青睐。 在进行蛋白表达时,选择合适的标签有利于蛋白的纯化,促进蛋白的可溶性,因此了解几种常用的蛋白纯化标签很重要。一般来说,常用的蛋白纯化标签主要有 His tag、GST tag、MBP tag、NusA tag、Strep tag 等,那么这些蛋白纯化标签有什么不同之处呢? His tag(组氨酸标签) 融合蛋白是目前最常用的表达
得到所需的蛋白质,为目前所常用的技术方法。 His-tag系统有很高的蛋白产量(5–40 mg/ml resin),但理想情况下的纯度约为80%左右。但如需在随后的分析中测量蛋白质的功能,就需要再进行更多的cleaning steps。 Strep-tag®系统一步纯化满足的纯度可达到95%,无需进行更多的纯化步骤即可直接进行蛋白的分析。产量数据为16 mg/ml。 深度对比Strep-tag®与His-tag系统 His-tag是以6个组氨酸残基组合的融合标签,其基于蛋白质表面的组氨酸残基侧链
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