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- 湖北省武汉市
- Methanosarcina mazei MM_1699 重组蛋白表达
- 2025年12月08日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 服务名称：
大肠杆菌系统重组蛋白表达
- 提供商：
普健生物（武汉）科技有限公司
Uniprot号：Q8PW97
基因名：MM_1699
蛋白名：Putative 2'-deoxynucleoside 5'-phosphate N-hydrolase 1
蛋白别名：
Putative 2'-deoxynucleoside 5'-phosphate N-hydrolase 1
服务内容：
| 服务项目 | 客户提供 | 服务内容 | 服务周期 | 交付内容 |
|---|---|---|---|---|
| 大肠杆菌系统 蛋白表达 |
基因序列 | 方案沟通 | 1天 | 方案报告 |
| 密码子优化和基因合成 | 5天 | 基因合成报告 | ||
| 表达纯化测试 | 3天 | 表达纯化测试报告 | ||
| 1L表达及纯化 | 3天 | 蛋白样品(3-5mg)及报告 | ||
| 放大发酵及纯化 | 7天 | 纯化的蛋白及报告 |
案例展示：
Q8PW97相关研究文献：
1. The genome of Methanosarcina mazei: evidence for lateral gene transfer between Bacteria and Archaea.
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文献和实验态细胞的制备方法和转化实验的基本操作。【实验原理】将重组质粒转入大肠杆菌的过程称为转化。转化所用的大肠杆菌需要用物理或化学方法特殊处理，使重组 DNA 分子容易进入细胞内，被处理后易于接纳 DNA 分子的细胞称作感受态细胞。下面介绍感受态细胞的制备。【实验试剂与器材】大肠杆菌菌株，LB 培养基，100 mM CaCl2 ，DMSO 或 2-巯基乙醇，离心机，振荡器，冰浴【实验方法与步骤】（一）感受态细胞的制备1. 将大肠杆菌菌株在 LB 琼脂培养基上画线，37 ℃ 培养 12～16 h；2. 次日从琼脂平板上取
（细菌内同源重组AdEasy System）一、目的基因的克隆（以pshuttle-CMV质粒为例）步骤1、选择适当酶切位点，进行酶切连接，将目的片段插入pshuttl-CMV质粒多克隆位点。2、重组质粒鉴定： 酶切鉴定或测序。3、重组质粒扩增，纯化并准备适量含目的基因的穿梭质粒。4、用PmeI单酶切线性化重组穿梭质粒，电泳鉴定质粒完全被切开。5、胶回收线性化质粒，以备共转化使用。二、共转化 1、大肠杆菌BJ5183电转感受态制备 （1）从新鲜琼脂板上挑取单个BJ5183细菌，接种于LB
: 500 mM Tris-HCl, pH 8.0, 150 mM MgCl2 in sterile double distilled water. 5 ml 1 M Tris-HCl, pH 8.0 1.5 ml 1 M MgCl2 sddH2O to 10 ml 50:2:10 TTE: 50 mM Tris-HCl, pH 8.0, 2% Triton X-100, and 10 mM EDTA in double distilled water
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