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- 再康生物
- ZK-0048304
- 中国
- 2025年11月20日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
50
- 英文名：
DNS试剂 / DNS显色液 / 3,5二硝基水杨酸溶液 DNS Reagent
- 保质期：
有效期一年
- 供应商：
上海再康生物科技有限公司
- 保存条件：
阴凉避光保存；有效期一年。
- 规格：
100mL；500mL
产品简介
DNS即二硝基水杨酸法是利用碱性条件下，二硝基水杨酸（DNS）与还原糖发生氧化还原反应，生成3-氨基-5-硝基水杨酸，该产物在煮沸条件下显棕红色，且在一定浓度范围内颜色深浅与还原糖含量成比例关系的原理，用比色法测定还原糖含量的。因其显色的深浅只与糖类游离出还原基团的数量有关，而对还原糖的种类没有选择性，故DNS方法适合用在多糖（如纤维素、半纤维素和淀粉等）水解产生的多种还原糖体系中。
操作步骤(仅供参考)：
1、 还原糖的提取：
2、 总糖的水解和提取：
3、 制作葡萄糖标准曲线：取干净离心管或试管，按下表进行操作，以0号调零，检测540nm处吸光度，以吸光度值为纵坐标，各标准浓度(mg/ml)为横坐标作图得标准曲线。
| 加入物质(ml) | 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| Glu标准(1mg/ml) | 0 | 0.2 | 0.4 | 0.6 | 0.8 | 1 |
| 蒸馏水 | 1 | 0.8 | 0.6 | 0.4 | 0.2 | 0 |
| DNS试剂 | 2 | 2 | 2 | 2 | 2 | 2 |
| 沸水浴中5分钟后取出，流水冷却至室温 | ||||||
| 蒸馏水 | 9 | 9 | 9 | 9 | 9 | 9 |
| 相当于葡萄糖量 | 0 | 0.2 | 0.4 | 0.6 | 0.8 | 1 |
4、还原糖测定：取制备好的还原糖提取液或者总糖水解液1ml，分别加入DNS试剂2ml，其余操作同标准曲线的操作，540nm处测定各管的吸光度。
计算：
还原糖的百分含量：
还原糖含量(%)=(C×VT)/(m×Vs)×100
总糖的百分含量：
总糖含量(%)=(C×VT)/(m×Vs)×100×10×0.9
注意事项：
1、 上述低温试剂避免反复冻融，以免失效或效率下降。
2、 待测样本如不能及时测定，应置于2~8℃保存，3天内稳定。
3、 如果样品还原糖浓度过高，应用蒸馏水稀释后重测，结果乘以稀释倍数。
4、 总糖计算公式在测定干扰杂质很少、还原糖含量相对总糖含量很少时使用，×0.9是为了从测定出的总糖水解成单糖中，扣除水解时所消耗的水量。
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文献和实验荧光，可以与DNS—Cl 的黄色荧光区分开来。 三、 仪器 、原料和试剂 仪器 层析缸、聚酰胺薄膜、电吹风、紫外灯、毛细管、真空干燥箱、具塞磨口试管、水浴锅、水解管(硬质玻璃)等。 原料 蛋白或多肽样品(如胰岛素) 试剂 1. 各种层析纯标准氨基酸 2. DNS—Cl 丙酮溶液：称取250mgDNS—Cl 溶于100mL 丙酮中，贮于棕色瓶中，置冰箱保存，一个月内稳定
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人转录因子E2F1 ( E2F1 )ELISA 试剂盒 原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA 法。用抗人 E2F1 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 E2F1与单抗结合，加入生物素化的抗人 E2F1 ，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的 Streptavidin 与生物素结合，加入底物工作液显蓝色，最后加终止液硫酸，在 450nm 处测 OD 值，E2F1 浓度与 OD 值成正比
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