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2-8℃
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6个月
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100
- 供应商:
百欧泰
- 规格:
10 ml/20 ml
| 规格: | 10 ml | 产品价格: | ¥950.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 20 ml | 产品价格: | ¥1500.0 |
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文献和实验Green荧光染料做常规实时定量PCR在Gene Amp® SDS 5700荧光PCR仪检测进行PCR反应初筛HLAA2与非A2,与普通PCR做对照。SYBR Green荧光PCR反应条件:94℃3分钟,然后94℃1分钟、退火温度1分钟、72℃1分钟共30个循环,72℃延伸5分钟。第一步反应的退火温度为63℃,第二步、第三步反应的退火温度为65℃,第四步反应的退火温度为64℃。 1.4.3 PCR芯片上进行SYBR Green荧光PCR反应PCR反应法同Taqman荧光PCR,探索不同反应
solution)to microcentrifuge tube. 2.Add 2.5x 10,000 particles of 1 uM Fluosphere beads. 3.Mix overnight at 4 ℃ with 200 µl 5mg/ml 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)-carbodiimide. 4.Wash with PBS,by centrifuging,repeat wash 3 times. 5.Resuspend the bead
个循环比较合适,若大于30则应使用较高的模板浓度,如果Cp小于15则应选择较低的模板深度。对于Cp值的确定,经验上是SYBR Green I探针的荧光信号比本底高2倍,杂交探针的荧光强度比本底高0.3倍。 2. 使用SYBR Green I测定DNA时的条件优化: 2.1 MgCl2的浓度:大多数引物-模板对其的要求是2-4 mM。 2.2 模板的浓度:初次实验要求做一系列的稀释浓度,如条件限制,至少完成两个稀释的度的测定。基因
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