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- 源叶
- 中国
- K39439-500μl
- 2025年10月29日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-80℃
- 英文名：
pLenti-TPR-sgRNA
- 库存：
99
- 供应商：
上海源叶生物科技有限公司
- 规格：
500μl
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文献和实验℃冷冻柜。在制备RNA时，将储存于冷冻柜的材料取出，立即以加入液氮研磨的方式打破细胞，不可以先行解冻，以避免RNase的作用。 1. 将组织在液N中磨成粉末后，再以50-100 mg组织加入1 ml Trizol液研磨，注意样品总体积不能超过所用Trizol体积的10%；提取细胞RNA时，先离心沉淀细胞，每5-10×106个细胞加1 ml Trizol后，反复用枪吹打或剧烈振荡以裂解细胞； 2. 将上述组织或细胞的Trizol裂解液转入EP管中,在室温15~30 ℃下放置5分钟
从原代构建到多组学验证，肾小管类器官慢病毒工程化标准操作Protocol！
、5%CO₂培养箱中静置约20分钟使液滴凝固。 7.加入预热完全培养基（24孔板500μL/孔、12孔板1mL/孔、6孔板2.5mL/孔），镜下观察类器官状态。 8.37℃、5%CO₂培养箱中培养，每3-4天换液。 肾小管类器官慢病毒转导 本部分介绍HEK293T细胞制备慢病毒颗粒，以及旋转感染法转导肾小管类器官的操作。 1.接种HEK293T细胞（转染第1天） a.吸弃15cm培养皿中HEK293T细胞的培养基。 b.沿皿壁轻轻加入10mLDPBS，轻柔晃动洗涤贴壁细胞。 c
；2. 将上述组织或细胞的Trizol裂解液转入EP管中,在室温15~30C下放置5分钟；3. 在上述EP管中，按照每1ml TRIZOL加0.2ml氯仿的量加入氯仿，盖上EP管盖子，在手中用力震荡15秒，在室温下（15℃～30℃）放置2～3分钟后，12000g（2℃～8℃）离心15分钟；4. 取上层水相置于新EP管中,按照每1ml TRIZOL加0.5ml异丙醇的量加入异丙醇，在室温下（15℃～30℃）放置10分钟,12000g（2℃～8℃）离心10分钟；5. 弃上清，按照每1ml TRIZOL加
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