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RT
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见标签
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999
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联硕生物
- CAS号:
12167-74-7
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10G

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文献和实验细胞转染的方法主要有三种,分别是磷酸钙-DNA 共沉淀法、DEAE-葡聚糖转染、脂质体介导 DNA 转染法,今天师兄就先从磷酸钙-DNA共沉淀法讲起。 磷酸钙-DNA共沉淀法 核酸以磷酸钙-DNA 共沉淀物的形式出现时,可使 DNA 附在细胞表面,这回利于细胞吞入摄取核酸,或通过细胞膜脂相收缩时裂开的空隙进入细胞内,进入细胞的DNA,仅有1%~5%可以进入细胞核中,其中仅有不到1%的DNA可以与细胞 DNA 整合,在细胞中进行稳定表达,基因转导的频率大约为10-4,这项技术
摘要: 核酸以磷酸钙-DNA共沉淀物的形式出现时,可使DNA附在细胞表面,利于细胞吞入摄取,或通过细胞膜脂相收缩时裂开的空隙进入细胞内,基因转导的频率大约为10-4,这项技术能用于任何DNA导入哺乳类动物进行暂时性表达或长期转化的研究.此方法对于贴壁细胞转染是最常用并首选的方法. 磷酸钙
磷酸钙转染法 材料: 质粒DNA 指数生长的真核细胞 2 M CaCl2 2×HBS (pH 7.05) 配方: 2×HBS (pH7.05):900 ml 超纯水中加入NaCl 16.3 g, KCl 0.74 g, Na2HPO4 0.214 g,Glucose 2.4 g 和HEPES 10 g,调pH 至7.05,定容至1 升,过滤(0.2 μm 滤 膜)后储存于4℃备用。 方法: 1. 细胞分盘: 通过胰酶消化收集细胞,用适当的完全
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