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合肥博美
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2×50ml
黏蛋白染色液(温和甲基化法)
区分黏蛋白中酸性基团:羧基和硫酸根
酸性甲醇与阿利新蓝联合使用,碳水化合物含有羧基呈阴性,出现任何着色则意味着含有硫酸根。
仅限于科研实验 禁止临床使用
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文献和实验methylation sensitive restriction endonuclease,MSRE是一类对其识别位点含有甲基化碱基敏感的限制性内切酶,目前至少已发现320种。此类酶如在其切割位点中含有一个甲基化碱基,则它们中的绝大多数就不能切割DNA。MSRE法是基于甲基化敏感Ⅱ型限制性内切酶不能切割含有一个或多个甲基化切点序列的基本原理。用甲基敏感Ⅱ型内切酶及其同工酶(对甲基化不敏感)切割含有一个或多个甲基化CpG序列的片段,然后用DNA印迹法分析。此法的最大优点就是无须
的凝胶。 l 结合反应 1. 用 23 μ l H2 O 溶解已干燥、甲基化的、标记的 DNA 沉淀( 2 号管)。 2. 加入: poly(dI-dC) • poly(dI-dC)(1 μ g/ μ l) 2 μ l 蛋白提取液
的甲基化检测,特异位点甲基化的检测和新甲基化位点的寻找。根据研究所用处理方法不同可以分为:基于PCR的甲基化分析方法;基于限制性内切酶的甲基化分析方法;基于重亚硫酸盐的甲基化分析方法和柱层法等。Christina Dahl和Per Guldberg[3]归纳总结了主要的甲基化分析方法及相关特性,在此基础上我们略加以补充。 2 甲基化研究方法学回顾 2.1 基因组整体水平甲基化分析 2.1.1 高效液相色谱柱(HPLC)及相关方法 HPLC是一种比较传统的方法,能够定量测定基因组整体水平DNA甲基化
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