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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 免疫原:
Recombinant human Caspase 8 protein
- 亚型:
IgG
- 保存条件:
Store at -80°C.
- 克隆性:
Polyclonal
- 标记物:
Unconjugated
- 适应物种:
human, mouse
- 宿主:
Rabbit
- 应用范围:
WB, IHC, IF/ICC, IP, ELISA
- 靶点:
Caspase 8/P43/P18
- 抗体英文名:
Caspase 8/P43/P18 Polyclonal antibody, PBS Only
- 抗体名:
Caspase 8/P43/P18 Polyclonal antibody, PBS Only
- 规格:
100ug
产品信息
13423-1-PBS targets Caspase 8/P43/P18 in WB, IHC, IF/ICC, IP, ELISA applications and shows reactivity with human, mouse samples.
| 经测试应用 | WB, IHC, IF/ICC, IP, ELISA |
| 经测试反应性 | human, mouse |
| 免疫原 |
CatNo: Ag4214 Product name: Recombinant human Caspase 8 protein Source: e coli.-derived, PGEX-4T Tag: GST Domain: 1-270 aa of BC028223 Sequence: MDFSRNLYDIGEQLDSEDLASLKFLSLDYIPQRKQEPIKDALMLFQRLQEKRMLEESNLSFLKELLFRINRLDLLITYLNTRKEEMERELQTPGRAQISAYRVMLYQISEEVSRSELRSFKFLLQEEISKCKLDDDMNLLDIFIEMEKRVILGEGKLDILKRVCAQINKSLLKIINDYEEFSKERSSSLEGSPDEFSNGEELCGVMTISDSPREQDSESQTLDKVYQMKSKPRGYCLIINNHNFAKAREKVPKLHSIRDRNGTHLDAGTV |
| 宿主/亚型 | Rabbit / IgG |
| 抗体类别 | Polyclonal |
| 产品类型 | Antibody |
| 全称 | caspase 8, apoptosis-related cysteine peptidase |
| 别名 | CASP8, Caspase 8, Apoptotic cysteine protease, Apoptotic protease Mch-5, CAP4 |
| 计算分子量 | 538 aa, 62 kDa |
| 观测分子量 | 53-57 kDa, 32-45 kDa |
| GenBank蛋白编号 | BC028223 |
| 基因名称 | Caspase 8 |
| Gene ID (NCBI) | 841 |
| RRID | AB_2068463 |
| 偶联类型 | Unconjugated |
| 形式 | Liquid |
| 纯化方式 | Antigen affinity purification |
| UNIPROT ID | Q14790 |
| 储存缓冲液 | PBS only, pH 7.3. |
| 储存条件 | Store at -80°C. The product is shipped with ice packs. Upon receipt, store it immediately at -80°C |
背景介绍
CASP8, also named as MCH5, MACH, FLICE, and CAP4, belongs to the peptidase C14A family. It may participate in the GZMB apoptotic pathways and functions as an upstream regulator in a-bisabolol-induced apoptosis. CASP8 catalyzes an essential intermediate step in the ubiquitination and proteasome-mediated degradation of IRF3(PMID:21816816 ). It may control diabetic embryopathy-associated apoptosis via regulation of the Bid-stimulated mitochondrion/caspase-9 pathway (PMID:19194987). CASP8 is expressed as nine isoforms by alternative splicing with the molecular mass from 26 kDa to 62 kDa. This antibody can recognize the pro- and cleaved-caspase 8.
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文献和实验, 5~10min/次?→ECL显影或NBT/BCIP显色。结果:2、荧光分光光度计分析原理:活化的Caspase-3能够特异切割D1E2V3D4-X底物,水解D4-X肽键。根据这一特点,设计出荧光物质偶联的短肽Ac-DEVD-AMC.在共价偶联时,AMC不能被激发荧光,短肽被水解后释放出AMC,自由的AMC才能被激发发射荧光。根据释放的AMC荧光强度的大小,可以测定caspase-3的活性,从而反映Caspase-3被活化的程度。 方法:收获细胞正常或凋亡细胞,PBS洗涤,制备细胞裂解液,加Ac
的Caspase-3及对底物多聚(ADP-核糖)聚合酶[poly(ADP-ribose)polymerase,PARP]等的裂解。方法: 收集细胞→PBS洗涤→抽提细胞裂解液→蛋白定量→SDS-PAGE电泳→硝酸纤维素膜或PVDF膜转移→5%脱脂奶粉封闭,室温1.5~2h或4°C过夜→Caspase-3多抗或单抗室温反应1~2h或4°C过夜→TBS-T(含0.05% Tween 20的TBS)洗3次,5~10min/次→HRP-标记的羊抗鼠IgG或AP标记的羊抗鼠IgG室温反应1~2h→ TBS-T洗3次
发光基团pNA游离出来,可通过酶标仪或分光光度计(λ=405nm 或400nm)测定其吸光值,通过测定吸光度来检测Caspase的活性。 二、自备试剂 PBS、蛋白定量试剂盒(Bradford法,选用) 三、实验操作指南 1.准备工作: A、 裂解液溶解后混匀,冰浴备用。 B、 裂解液工作液制备:每50 μL裂解液中加入0.5 μL DTT,冰浴备用。 2.样本处理: A、悬浮细胞 1) 诱导完成后的细胞,2000 rpm离心5 min,弃上清,收集细胞,PBS轻轻重悬细胞并计数
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