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- 英文名:
Gibco™ CTS™ TrypLE™ Select Enzyme
- 保质期:
24 个月
- 供应商:
上海然其生物科技有限公司
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在 15°C-30°C 避光储存,也可在 2°C-8°C 或 - 5°C 至 - 20°C 储存,室温下运输,有效期为 24 个月。
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文献和实验抗原修复方法 Antigen Retrieval Methods
蛋白酶等酶已被成功用于恢复抗体与其表位的结合。其作用机制被认为是切割可能掩盖表位的肽段。PIER的缺点是恢复免疫反应的成功率较低,并且可能破坏组织形态和目标抗原。 热诱导表位修复(HIER) HIER被认为可以逆转某些交联,并恢复表位的二级或三级结构。该方案必须针对每种组织、固定方法和待研究的抗原进行优化。一般来说,HIER的成功率远高于PIER。HIER可在微波炉、高压锅、蒸锅、高压灭菌器或水浴锅中进行。微波炉是HIER中越来越常用的设备。这些方案通常包括5分钟的加热,然后更换缓冲液。对于所有HIER
0.1%(w/v)的明胶,室温静置 15min 至明胶凝固。 2、在明胶上接种丝裂霉素处理过的 MEFs 细胞悬浮液,细胞数约为 1.8×106个。放置在 7℃,5%CO2 的培养箱中培养至细胞汇合度 70-80% 时进行传代。 3、吸去 MEFs 培养基,将 ESCs 接种于明胶上,添加 10ml ESCs 培养基,放置在 37℃,5%CO2 的培养箱中培养 3-5 天。 4、向 hESCs 中加入 1ml TrypLE Express,并将培养皿放置在 37℃ 条件下进行解离,直到所有的细胞都以小细胞
;因此蛋白在低温下能量较低,也就不容易变性。)在溶液中,部分蛋白活性的损失是由容器壁的吸附、寡聚酶的解聚以及氧化剂、水解酶、微生物等痕量污染物对蛋白质的灭活等原因造成的,而在越高的蛋白浓度下(毫克每毫升范围或更高),损失的蛋白活性占蛋白总活性的比例也就越低。正确的PH值的重要性 图4 pH值对稳定性的影响。进行试验的溶液包括HEPES (a)、citrate (b)、MOPS (c)、 glycine (d)、Tris (e)和saline (f),并都与Stabilzyme Select
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