去垢剂筛选试剂盒

膜蛋白纯化攻略分享

1. 去垢剂类型和特点表 常用的去垢剂大概有十几种，根据膜蛋白分子量可选用下面两根预装柱进行快速筛选： 表 2. 用两根预装柱快速筛选去垢剂结果表   运行流速设为 0.5 mL/min，15 min 以内就可以筛选一个去垢剂，而且上样量 5-50μL，可节省样品。 标签 摸索得到合适的去垢剂之后，就可以进行常规的层析实验。 增溶之后，高速离心取上清过亲和层析柱，为了减少后续的处理步骤，往往设计较小的标签，一般使用 HIS 或者 Strep，如果使用 GST 标签，则需要引入酶切位点。   标签

最难搞的膜蛋白纯化攻略来了！

本身保持空间构象和活性。 去垢剂可分为三种： 常用的去垢剂大概有十几种，根据膜蛋白分子量可选用下面两根预装柱进行快速筛选： 运行流速设为 0.5 ml/min，15 min 以内就可以筛选一个去垢剂，而且上样量 5-50µl，可节省样品。 标签 摸索得到合适的去垢剂之后，就可以进行常规的层析实验。 增溶之后，高速离心取上清过亲和层析柱，为了减少后续的处理步骤，往往设计较小的标签，一般使用 HIS 或者 Strep，如果使用 GST 标签，则需要引入

免疫沉淀原理

的构象对去垢剂种类和浓度非常敏感，因此针对这类蛋白的免疫沉淀实验，需要谨慎地尝试多种去垢剂以及不同浓度。 （3）蛋白相互作用：不同去垢剂对不同性质的蛋白质的相互作用影响程度不一样，需要根据具体蛋白的特性进行分析选择去垢剂种类和浓度。而由于何种去垢剂适应作用于何种蛋白质现在很难精准预测，所以一个更为切实可行的办法就是通过具体实验筛选合适的去垢剂种类和浓度。 二、 抗体-agarose beads孵育 裂解细胞，离心并去除不可溶的膜组份后，上清可以储存在-80°保存3个月，但最好能够使用新鲜