细胞蛋白酶体提取试剂盒（低速）

实验操作篇

，不能得到足够的菌量来抽提质粒，摇菌时间一般 12-14 小时为宜。 ③质粒属于低拷贝类型，导致收集的细菌量过少。 ④提取时菌量过多：容易导致裂解不充分，且容易超过硅胶膜柱的承载上限，最终使得质粒提取效率降低，建议参考提取试剂盒建议的菌液量来提取。 ⑤质粒提取实验操作不当：比如在加入缓冲液重悬菌体时，菌体没有充分分散悬浮，导致后续裂解不充分。为指示菌体是否充分裂解，可以考虑在重悬缓冲液中加入指示剂（QIAGEN 质粒提取试剂盒中均有配备 LyseBlue 指示剂），均匀蓝色指示悬浮充分。 ⑥试剂使用

qPCR 实验中遇到这 3 个问题怎么办？

如果您的样本是组织，取样的过程非常重要。组织内部是有内源性 RNase 存在的，组织离体后内源性 RNase 则开始发挥作用，RNA 产生降解。所以离体的组织必须立马放在液氮中速冻，之后转移至 -80℃ 长期保存，且避免反复冻融。研磨组织的过程中需要保证在液氮环境中研磨。RNA 提取的过程中，保证样本的上样量不超过提取试剂盒说明书中规定的最大上样量，上样量过多，同样会造成 RNA 降解。 ②如果您的样本是细胞，则样本搜集过程要简单的多了，只要保证细胞状态良好（细胞状态差也容易造成提取的 RNA 降解

干货：外泌体研究实操中的常见问题解答

沉淀。 5、开封后的 ECS 试剂有沉淀出现是否可以继续使用？ 答：沉淀物如果是结晶状，建议 56 度水浴摇晃混匀。如果结晶消失，则可以继续使用，少量沉淀不影响提取效果。 6、乳液提取试剂盒加 solution B 之后无豆花状固体，此时是否可以继续实验？ 答：不可以，必须在明确看到豆花状沉淀，溶液变透明后才可进行下一步操作。此时需要继续加入适量 solution B，并在 37 度水浴加热，直至看到豆花状沉淀。 7、如何选择血清和血浆样本来进行外泌体研究？ 答：血清和血浆都是常见的外泌体样本