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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
充足
- 供应商:
广州英赞生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
K005A,10 μL反应 × 20 次 /K005B,10 μL反应 × 100 次
| 规格: | K005A,10 μL反应 × 20 次 | 产品价格: | ¥320.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | K005B,10 μL反应 × 100 次 | 产品价格: | ¥1280.0 |
【储存条件】-20℃保存。
【产品概述】TA-克隆试剂盒适用于克隆带有 3’末端 A 突出的的 PCR 产物。试剂盒提供的pUCm-T 载体是为简化 PCR 产物的克隆而设计的,许多热稳定的 DNA 聚合酶,如 TaqDNA 聚合酶、Tth DNA 聚合酶等扩增的 PCR 产物在 3’末端后都带有一个突出的碱基 A,这样的 PCR 产物很容易连接到带有突出碱基 T 的 pUCm-T 载体上。 该载体的多克隆位点大多是单切点,并且调整了β-半乳糖苷酶读码框,更有利于克隆的蓝/白筛选。插入位点两端独特设计的两个 PstI 位点使插入片段可以用 Pst I 单酶切进行检测,也可以用非常廉价而高效的 EcoR I 和 Hind III 双酶切进行检测。可以用 M13 通用引物和 T7 启动子引物对 PCR 产物进行测序。pUCm-T 含有 T7 RNA 聚合酶的启动子,可以对插入片段进行体外转录。

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文献和实验This protocol uses Promega''s pGEM-T kit (#A3600). PCR For TA cloning, it is optimal if the PCR primers have G''s at the 5'' end as this will maximize the probability of Taq polymerase adding the terminal A overhang
on a gel and proceed immediately to the cloning reaction. 2.Prepare for the Transformation Reaction. a.Set water bath to 42℃. b.Warm SOC medium (Box 2) to room temperature. c.Warm pre-poured LB plates with 50 µg/ml ampicillin
at the end of the reaction to ensure that all products are full length and 3' adenylated. Check results on a gel and proceed immediately to the cloning reaction.2.Prepare for the Transformation Reaction.a.Set water bath to 42℃.b.Warm SOC medium (Box
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