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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100+
- 检测范围:
15.63-1000 pg/mL
- 检测方法:
Sandwich
- 灵敏度:
5.8 pg/mL
- 规格:
48T/96T
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥2240.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥3200.0 |
人磷酸化Tau蛋白(pτ)酶联免疫吸附检测试剂盒适合聚焦信号传导、分子机制与差异表达研究的实验室,尤其适合组织样本相关定量验证,用于定量检测样本中 pτ 水平变化,帮助开展分组比较、表达差异分析与机制验证。核心优势是采用 Sandwich ELISA 方案,单次实验约 3.5 小时、每孔样本量 100 μL,兼顾常规批量检测效率与结果对比需求。适用样本包括 血清、血浆、组织匀浆、cell lysates、cell culture supernates及其他生物液体,检测范围 15.63-1000 pg/mL,灵敏度 5.8 pg/mL。
基础信息
| 英文名称 | Human pτ(phospho Tau Protein) ELISA Kit |
|---|---|
| 相关别称 | pτ; AI413597; AW045860; DDPAC; FLJ31424; FTDP 17; G protein beta1/gamma2 subunit interacting factor 1; MAPT; MAPTL |
| 货号 | ELK9841 |
| 品牌 | ELK Biotechnology 科鹿生物 |
| 规格 | 48T / 96T |
| 检测方法 | Sandwich |
| 适用样本 | 血清、血浆、组织匀浆、cell lysates、cell culture supernates及其他生物液体 |
| 检测范围 | 15.63-1000 pg/mL |
| 灵敏度 | 5.8 pg/mL |
| 标准品 | 1000 pg/mL |
| 研究领域 | 信号传导 |
试剂盒组成
| 组分 | 48T | 96T | 保存条件 |
|---|---|---|---|
| 酶标板(可拆)(Pre-coated Microplate) | 6 条 × 8 孔 | 12 条 × 8 孔 | 4°C/-20°C |
| 冻干标准品(Standard (lyophilized)) | 1 | 2 | 4°C/-20°C |
| 标准品&样品稀释液(Standard/Sample Diluent Buffer) | 10 mL | 20 mL | 4°C/-20°C |
| 浓缩生物素化抗体(100×)(Biotinylated Antibody (100×)) | 60 μL | 120 μL | 4°C/-20°C |
| 生物素化抗体稀释液(Biotinylated Antibody Diluent) | 6 mL | 12 mL | 4°C/-20°C |
| 浓缩HRP酶结合物(100×)(Streptavidin-HRP (100×)) | 60 μL | 120 μL | 4°C/-20°C |
| 酶结合物稀释液(HRP Diluent) | 6 mL | 12 mL | 4°C/-20°C |
| 浓缩洗涤液(25×)(Wash Buffer (25×)) | 10 mL | 20 mL | 4°C/-20°C |
| 显色底物溶液(TMB)(TMB Substrate Solution) | 6 mL | 10 mL | 4°C/-20°C(避光) |
| 反应终止液(Stop Reagent) | 3 mL | 6 mL | 4°C/-20°C |
| 封板覆膜(Plate Covers) | 1 | 2 | 常温 |
| 产品说明书(Instruction Manual) | 1份 | 1份 | 常温 |
保存条件
试剂盒拆封后可 4°C 保存 1 周,如果 1 周内未用完,请将剩余酶标板,冻干标准品,浓缩生物素化抗体,浓缩 HRP 酶结合物放置在-20°C 保存,其他试剂4°C 保存,并在6 个月内用完。
若试剂盒未拆封:4°C(短时间存放,6 个月内有效);-20°C(长时间存放,1 年内有效);避免反复冻融,过期后请勿使用。
如果试剂盒整盒保存在-20°C,请在实验前一天晚上将试剂盒放置在4°C。
操作流程
![]() |
|
检测原理
人磷酸化Tau蛋白(pτ)酶联免疫吸附检测试剂盒采用夹心法原理。将特异性抗人 pτ抗体包被于96孔微孔板中,向微孔中分别加入人 pτ标准品或样本,使标准品中的人 pτ蛋白或样本中的人 pτ蛋白与固相于微孔板上的抗人 pτ抗体结合,然后加入生物素化抗人 pτ抗体,将未结合的生物素化抗体洗净后,加入HRP标记链亲和素,再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人 pτ蛋白呈正相关。用酶标仪在450 nm波长下测定吸光度(OD值),通过绘制标准曲线计算出样品浓度。
性能验证数据
标准曲线
| Concentration (pg/mL) | OD | Corrected OD |
|---|---|---|
| 1000.00 | 2.266 | 2.179 |
| 500.00 | 1.506 | 1.419 |
| 250.00 | 1.109 | 1.022 |
| 125.00 | 0.871 | 0.784 |
| 62.50 | 0.593 | 0.506 |
| 31.25 | 0.313 | 0.226 |
| 15.63 | 0.241 | 0.154 |
| 0.00 | 0.087 | 0.000 |

精密度
板内精密度(测定内的精密度): CV% < 8%
三个已知浓度的样品分别在1个酶标板上测试20次,以评估分析板内精密度。
板间精密度(测定板间间精密度): CV% < 10%
三个已知浓度的样品分别在3个不同的酶标板上测试40次,以评估分析板间的精密度。
回收率
分别往不同样本中添加已知浓度的人 pτ, 做回收率实验,得出回收率范围和平均回收率
| 样本类型 | 回收率范围 | 平均回收率 |
|---|---|---|
| 血清(n=5) | 87-99% | 93% |
| EDTA 血浆(n=5) | 80-97% | 88% |
| Heparin 血浆(n=5) | 84-96% | 90% |
线性
将添加有人 pτ的样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围
| 样本类型 | 1:2 | 1:4 | 1:8 | 1:16 |
|---|---|---|---|---|
| 血清(n=5) | 90-96% | 95-102% | 87-98% | 79-96% |
| EDTA 血浆(n=5) | 82-98% | 93-106% | 89-98% | 96-105% |
| Heparin 血浆(n=5) | 92-105% | 95-107% | 82-96% | 86-105% |
常见问题
Q:这款 pτ ELISA 试剂盒更适合哪些研究场景?
A:人磷酸化Tau蛋白(pτ)酶联免疫吸附检测试剂盒聚焦信号传导、分子机制与差异表达研究的实验室,尤其适合组织样本相关定量验证,可用于样本中 pτ 的定量比较、分组筛查和机制验证。结合其适用样本 血清、血浆、组织匀浆、cell lysates、cell culture supernates及其他生物液体,适合常规科研检测和阶段性课题验证。
Q:48T 和 96T 规格应该怎么选,更适合哪种采购场景?
A:如果当前以预实验、小批量验证或样本量较少的项目为主,可优先选择 48T;如果需要进行多批次分组比较、重复孔较多或计划连续检测,48T / 96T 中的 96T 规格更适合提高通量并减少补货频率。
Q:如果暂时不确定样本浓度,这款试剂盒是否仍然适合使用?
A:可以先结合本产品 15.63-1000 pg/mL 的检测范围和 5.8 pg/mL 的灵敏度进行预判断。若样本可能高于上限,建议先做梯度稀释后上样;若目标属于低丰度表达,这款试剂盒也适合做前期筛查和分组定量。
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文献和实验检测P—ERK,P--P38、P-JNK 需要血清饥饿24h吗?? 3-24h都有可能,看本底啥时候降到最低来决定. 3还有加药怎么加啊??做PCR都是用阻断剂孵育1h然后加TGF,WB我都是要在15min、30min、60min提蛋白检测。请问加药该如何加,是直接把TGF和阻断剂混匀加嘛??还是也孵育1h然后加TGF在上述时间提蛋白?? 先阻断1h,然后加刺激(没有阻断剂),建议也加上5分钟的,很多时候磷酸化甚至2分钟就开始了. 60min又回复到本底了
1. 前言 蛋白质翻译后磷酸化修饰是影响真核细胞每一个细胞内活动过程的最丰富的细胞调节形式。一个蛋白质的磷酸化能引起结构、稳定性、酶活,与其他分子之间相互作用的能力或其亚细胞定位的改变。蛋白激酶催化可逆的蛋白质底物的磷酸化,作用在其丝氨 酸、苏氨酸和酪氨酸残基位点上。如在拟南芥中,丝氨酸/苏氨酸激酶占整个蛋白质组 的 4% [1] ,但对它们的生物学功能还不十分了解。因此,我们需要能开展蛋白激酶全球分析的高通量蛋白质组学方法[ 2,3] 来鉴定下游底物。 用于确定磷酸化共有
运用Cell Based Elisa检测信号通路蛋白和磷酸化蛋白
研究信号通路时,特别是对于高通量样本检测,通过传统的WB方法来检测蛋白是一项非常费时费力的工作。为了解决这个问题,科学家开始尝试一种新的方法,希望更加高效,简单,没有任何辐射的来检测这些蛋白,尤其是信号传导研究中的磷酸化蛋白。Cell Based Elisa 提供了这样一种理想的,高效的,直接的检测大量样本的细胞信号通路蛋白的方法。我们通过了解Cell Based Elisa 的实验步骤来解析怎样检测高通量的样本中的蛋白,尤其是信号通路相关的蛋白。原理图1.在Cell Based Elisa中
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