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载基生物
▶ 服务介绍
TRAP(抗酒石酸酸性磷酸酶)染色是一种常用的组织化学染色方法,主要用于检测和定位组织中的TRAP酶活性。TRAP是破骨细胞的特异性标志酶,因此TRAP染色常用于研究破骨细胞的功能和分布。TRAP染色的基本原理是利用TRAP酶在特定条件下催化底物水解,产生有色产物,从而在显微镜下观察到红色或红棕色的阳性反应颗粒,这些颗粒主要定位在细胞质中。
▶ 实验步骤
1.石蜡切片常规脱蜡至水(冰冻切片省略这步)。
2.切片于纯水洗5分钟。
3.用组化笔在切片组织上画圈后,置于盛有纯水的湿盒中,用纯水37℃孵育2h。
4.倒去组织上纯水后,切片重新放入湿盒,滴加现配过滤好的trap工作液完全覆盖于切片组织上,放于37℃烤箱避光染色20-30min。
5.倾去染液,水轻洗玻片。
6.Mayer苏木素染液液滴染(浸染)1-2min,水洗。(此步骤为染核,可自选)。
7.切片经3缸无水乙醇,每缸5min→直接放入2缸二甲苯,每缸5min透明后,滴加中性树胶封片剂封片。
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Trap染色
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