茜素红染色

▶ 实验步骤

1.吸去培养基并洗涤：在成骨诱导分化结束后，吸去六孔板中的成骨诱导分化完全培养基，然后使用1×PBS轻柔洗涤2~3次。这样可以去除培养基中的成分，为后续的固定和染色做准备。
2.固定：每孔加入2mL 4%多聚 甲醛（或10%福尔马林），在室温下固定30分钟。多聚 甲醛或福尔马林是常用的组织固定剂，可以固定细胞和细胞内的成分，以保持其形态和结构。
3.洗涤：吸去固定液后，使用1×PBS轻柔洗涤2~3次，确保将固定液彻底清洗掉。这样可以去除多余的固定剂，以避免对后续染色结果的干扰。
4.染色：每孔加入2mL茜素红工作液，室温下染色5~10分钟。茜素红是一种常用的染色剂，可用于染色成骨组织或钙化区域。
5.洗涤：吸去茜素红染色液后，使用1×PBS轻柔洗涤2~3次，充分洗去多余的染色液。这样可以去除多余的染色剂，以获得清晰的染色结果。
6.观察：每孔加入2mL 1×PBS，将培养板置于显微镜下观察成骨染色效果。通过观察染色结果，可以评估成骨组织的形态和钙化区域的分布。
7.封装和保存：染色后的六孔板用封口膜封装，然后置于4℃保存，可保存2周。这样可以保持染色结果的稳定性和保存样本的完整性。