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- 2025年12月18日
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- 提供商：
载基生物
- 规格：
套
▶ 服务介绍
CLIP-qPCR（紫外交联免疫沉淀结合qPCR定量技术）是研究RNA结合蛋白（RBP）与RNA相互作用的重要方法，其核心原理是通过紫外交联与免疫沉淀捕获RNA-蛋白复合物，并结合qPCR进行定量分析。该技术利用365nm紫外光使细胞内RNA与RBP发生共价交联，增强相互作用稳定性，随后通过特异性抗体沉淀复合物，经酶消化（如蛋白酶K、DNase I）后提取RNA，最终通过qPCR对目标RNA结合位点的富集效率进行检测。
▶ 实验步骤
1.紫外交联：细胞经365nm紫外照射，使RNA与RBP形成共价交联。
2.免疫沉淀：利用特异性抗体捕获RBP-RNA复合物。
3.酶消化：通过蛋白酶K、DNase I等去除蛋白和DNA杂质，保留目标RNA。
4.RNA处理：对纯化后的RNA进行3'端加接头，设计位点特异性引物。
5.qPCR定量：通过荧光信号监测目标RNA的富集效率，精确定位结合位点
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