人弓形虫真核表达蛋白

【原创】真核表达His蛋白，进行天然构象蛋白纯化的心得和疑问。

由于要做酶活性实验，所以选择真核表达His标签蛋白进行非变形的纯化。（避免了原核表达可能得到没功能的蛋白。）先上图上真相：这个说明了：细胞超声裂解后，离心沉淀的碎片里含少量His标签的过表达目的蛋白（第一道），上清里含大量His蛋白（第二道）。之后用特殊的含有镍的树脂小球纯化His蛋白，由于裂解液体积太大了，就分了两次加到柱子里。第一次加进去之后4度孵育1h，然后弃流出液（第三道），第二次把剩下的裂解液加进去，同样4度孵育1h后弃流出液（第四道）然后用漂洗液洗2次柱子里的树脂，使得非特异性黏着

胞内晶体蛋白基因的酿酒酵母真核表达

技术公司；    5) 葡萄糖、半乳糖，AMERSCO进口分装，广州博理生物科技公司；    6) 限制性内切酶Bam H I、Xba I，大连宝生物工程公司；    7) 各类氨基酸，AMRESCO进口分装，广州博理生物科技有限公司；    8) YNB（Yeast Nitrogen Base），酵母氮碱，Bebco公司；    9) 低分子量蛋白质标准（14.4 kD～94.0 kD，5 bands），北京天为时代科技有限公司；    10

【求助】恳请推荐绿色荧光蛋白的真核表达载体

frankwolf 各位高手： 小的新手上路，恳请各位不吝指导。小的想用带有绿色荧光蛋白的真核表达载体将一个长度在600-1000bp的cDNA和一段长度几十个bp的shRNA转染入人类的细胞中，希望目的基因能够比较稳定的表达，并且使得细胞能在激光共聚焦显微镜下显示绿色。能否恳请各位分别为推荐cDNA和shRNA各推荐一种比较常用的、可行性比较好的、不太容易发生意外情况的带有绿色荧光蛋白的真核表达载体呢？多谢各位了！