猫冠状S、N真核表达蛋白

Cell Death Differ：中大五院黄曦团队发现新冠病毒引起肺损伤的分子机制

上皮细胞线粒体凋亡，并导致肺水肿的发生。 图片来源：Cell death & differentiation 病毒相关蛋白与细胞蛋白相互作用影响细胞凋亡过程。作者首先分别将携带刺突蛋白（Spike protein, S 蛋白），核衣壳蛋白（Nucleocapsid, N 蛋白），膜蛋白（Membrane protein, M 蛋白）和包膜蛋白（Envelope protein，E 蛋白）真核表达质粒载体分别转染人肺上皮 H292 细胞和人血管内皮 EA.hy926 细胞，通过荧光分光光度法检测胞内活化

【原创】蛋白质不表达：常见原因及分析

。但是有一点我可以有很大把握的说：对于真核表达，密码子优化只能起锦上添花的作用（确认有表达，以此来提高表达量），而不能雪中送炭（没有表达出来，通过密码子优化极有可能不奏效）。 4、质粒不稳定或者质粒丢失。pET系统通常比较稳定。但是你选用带氨苄青霉素抗性的载体时，也许有可能产生β-lactamase降解了抗生素，使质粒丢失。还有一种情况是表达重组的毒素蛋白，对宿主细胞也有毒性，造成质粒丢失。这种情况多见于真核表达系统。 5、蛋白酶将蛋白降解了。这种情况常由重组蛋白本身的N-或C-端序列引起

蛋白质翻译后修饰（PTMs)概述

or mass spectrometry.图示：S-亚硝基化 Weste Blot 试剂盒标记和检测 S-亚硝基化的反应。样品首先与 MMTS 反应，封闭 S-亚硝基化蛋白质中的游离巯基。然后用抗坏血酸盐选择性还原 snitroscysteine，并用 Thermo Scientific iodotmt zero 标记试剂进行标记。随后，使用提供的抗 TMT 抗体在免疫印迹中检测 TMT 标记蛋白。5、Methylation：一碳甲基转移至氮或氧（分别为 N-和 O-甲基化）至氨基酸侧链，增加了蛋白质的疏水