SUPERCULTURE 低内毒素胰酶消化液

Annexin V 荧光双染细胞凋亡检测试剂盒实验操作指南

悬液（4步骤处理过的细胞悬液）于载玻片上，并用盖玻片盖上细胞。在荧光显微镜下用双色滤光片观察。 B．贴壁细胞 一、流式细胞仪检测 按照实验方案进行凋亡诱导，将培养基吸出转移至干净离心管内（待用），用无钙、镁离子的PBS清洗培养瓶细胞一次。 培养瓶中加入适量的胰酶消化细胞，室温孵育至轻轻吹打可使贴壁细胞脱落，吸除胰酶消化液，避免胰酶消化过度。 注意：对于贴壁细胞，胰酶消化步骤很关键。胰酶消化时间如果过短，细胞需要用力吹打才能脱落，容易造成细胞膜的损伤，从而导致细胞坏死的假阳性；消化时间如果过长，同样

单细胞凝胶电泳的操作流程与注意事项

单细胞凝胶电泳(又名彗星实验)的操作流程主要包括单细胞悬液的制备、凝胶板制备、细胞裂解与解旋、电泳与中和、染色和观察等步骤。本文总结了单细胞凝胶电泳操作步骤和注意事项，希望对初入实验的同学有帮助。 一、分离制备单细胞悬液： 1. 体外培养的细胞株：用胰酶消化，最后用PBS悬浮吹打成单细胞悬液，细胞要计数，具体的量我前边已经说过。 2. 体内脏器细胞：处死动物，取出脏器，于Hanks’液中制备成单个细胞悬液。 二、胶板制备

【求助】胰酶和血清是否影响p-akt表达？

olivial 最近想用western blot检测小胶质细胞活化后细胞内p-Akt表达情况（包括时间点），那么提蛋白时可否用胰酶消化的方法？加药前是否要将完全培养液换成无血清培养液？ ylhuang0502 Q1. 提蛋白时可否的方法？ A1.: 不要用胰酶消化， 贴壁细胞处理后，立刻至于冰上，用PBS洗三次后，直接加lysis buffer裂解提蛋白，lysis buffer的组分可查查文献，或在本版搜一下。