小鼠单抗 MBP 标签

4 种常用的蛋白纯化标签说明

蛋白纯化的方法很多，如层析法、电泳法、超离心法、超滤等，其中蛋白质亲和层析法通常只需要一步操作便能将目标蛋白从混合物中分离出来，且纯度很高，因而备受实验者的青睐。 在进行蛋白表达时，选择合适的标签有利于蛋白的纯化，促进蛋白的可溶性，因此了解几种常用的蛋白纯化标签很重要。一般来说，常用的蛋白纯化标签主要有 His tag、GST tag、MBP tag、NusA tag、Strep tag 等，那么这些蛋白纯化标签有什么不同之处呢? His tag(组氨酸标签) 融合蛋白是目前最常用的表达

常用蛋白标签、序列及特性

（QPELAPEDPED），所以它不太可能干扰蛋白质结构或功能。荧光素酶常用于检测蛋白表达的报道基因。可以通过免疫学方法验证结果。麦芽糖结合蛋白（MBP）该标签的大小（43kDa）有助于其增加大肠杆菌中可溶性蛋白质的产量。与 GST 和硫氧还蛋白一起，它作为促溶标签也十分受欢迎。使用低成本的直链淀粉树脂（标签和蛋白质之间的 Asn10 spacer 能增强与树脂的结合能力）实现纯化。c-Mycc-Myc（或 myc）已广泛用于免疫印迹，免疫沉淀和流式细胞术。它的小尺寸（EQKLISEEDL）意味着它不太可能

纯化新思路——构建双标签蛋白

蛋白 StrepⅡ-六组氨酸-蛋白   02双标签蛋白可促进目的蛋白增溶性和特异性双重提高 当组氨酸标签蛋白表达量低，或纯化过程中蛋白不稳定时，可能是由于目的蛋白疏水性强导致溶解性不高、或未能正确折叠形成包涵体影响纯化效果。大分子增溶性蛋白标签，如 GST、MBP 标签可改善这一问题。但一步亲和难以满足高纯度蛋白的要求。大分子标签与小分子标签组合的双标签蛋白不仅可以提高目的蛋白溶解性和稳定性，还可以提高目的蛋白的特异性。 下图展示的是双标签绿色荧光蛋白（六组氨酸-绿色