本服务为大鼠炎症研究提供一站式 10 因子检测解决方案,配备现货固定 Panel(服务货号:LXRLBR10-1),无需客户自备任何试剂、耗材或仪器,从样本接收、前处理到数据分析全流程由专业团队操作。Panel 涵盖大鼠炎症反应中 10 种核心因子,可同步定量检测,单次实验即可获取多维度炎症数据,大幅节省样本用量(仅需 25-50μL / 样本)与实验时间,同时避免因试剂准备、操作差异导致的实验误差,确保结果稳定可靠。服务定价为 ¥22,778.00/96 孔板,支持批量样本检测,适配科研机构、药企等开展大鼠炎症模型构建、药物疗效评估、疾病机制研究等场景。
本服务的固定 Panel 包含 10 种大鼠炎症关键因子,覆盖促炎反应、抗炎调节、免疫细胞活化及趋化等核心通路,各指标功能及研究价值如下:
- IFN-γ(γ- 干扰素):主要由活化 T 细胞、NK 细胞分泌,作为 Th1 型免疫反应标志性因子,可激活巨噬细胞杀菌活性,增强抗肿瘤、抗病原体免疫,其表达异常与自身免疫病、感染性炎症密切相关;
- IL-10(白细胞介素 - 10):主要由 Treg 细胞、巨噬细胞分泌,具有强效抗炎作用,可抑制促炎因子(如 TNF-α、IL-1β)释放,调节免疫平衡,其水平变化可反映炎症缓解或慢性化趋势;
- IL-2(白细胞介素 - 2):由活化 CD4+T 细胞分泌,是 T 细胞增殖、分化的关键调控因子,可促进 CTL 细胞、NK 细胞活化,参与适应性免疫应答,在炎症免疫调控中起 “桥梁” 作用;
- IL-4(白细胞介素 - 4):Th2 型免疫反应核心因子,由 Th2 细胞、肥大细胞分泌,可诱导 B 细胞增殖分化、促进 IgE 生成,参与过敏性炎症、寄生虫感染相关炎症过程;
- IL-5(白细胞介素 - 5):主要由 Th2 细胞、嗜酸性粒细胞分泌,特异性调控嗜酸性粒细胞活化、增殖及趋化,是哮喘、过敏性鼻炎等嗜酸性粒细胞相关炎症的关键标志物;
- IL-6(白细胞介素 - 6):多源性促炎因子,由巨噬细胞、内皮细胞、T 细胞等分泌,可启动急性期炎症反应、促进 B 细胞分化,其高表达与急性感染、自身免疫病、肿瘤相关炎症密切相关;
- TNF-α(肿瘤坏死因子 -α):炎症级联反应 “启动因子”,由巨噬细胞、NK 细胞分泌,可诱导细胞凋亡、促进其他促炎因子释放,参与感染性休克、类风湿关节炎等重症炎症病理过程;
- IL-1β/IL-1F2(白细胞介素 - 1β):强效促炎因子,由活化巨噬细胞、单核细胞分泌,可激活内皮细胞、促进中性粒细胞趋化,在急性炎症、组织损伤修复中起关键作用;
- IL-12p70(白细胞介素 - 12p70):由树突状细胞、巨噬细胞分泌,是 Th1 型免疫反应关键诱导因子,可促进 T 细胞、NK 细胞分泌 IFN-γ,增强细胞免疫应答,在抗病原体、抗肿瘤炎症中不可或缺;
- CXCL1/GROα/KC/CINC-1(C-X-C 趋化因子配体 1):大鼠特有的中性粒细胞趋化因子,由上皮细胞、巨噬细胞分泌,可特异性募集中性粒细胞至炎症部位,是急性炎症早期诊断的重要标志物。
本服务采用液态流式(Luminex)技术(又称流式荧光、悬浮阵列、液相芯片技术),是近 20 余年发展成熟的高通量多指标检测技术,核心原理与优势如下:
- 技术核心:以荧光编码微球为载体,微球内部含两种免疫荧光,通过不同荧光比例可区分 100 种独立微球,每种微球表面偶联针对特定炎症因子的特异性抗体,可自由组合实现多指标并行检测;
- 检测流程:样本与荧光编码微球混合后,目标因子与微球表面抗体结合,再加入生物素标记的检测抗体形成 “抗体 - 抗原 - 检测抗体” 复合物,最后通过链霉亲和素 - PE(藻红蛋白)标记,利用激光激发(511nm LED 激发微球荧光,621nm LED 激发 PE 荧光)、高速数字信号处理技术,同步获取每种微球的荧光信号,实现 2-100 种生物分子的精准定量;
- 技术优势:① 高通量:一管样本可同步检测 10 种因子,96 孔板一次可处理大量样本;② 高灵敏度:检测下限低至 pg/mL 级别,可捕捉样本中微量因子变化;③ 高特异性:抗体经过严格筛选验证,无交叉反应;④ 样本经济性:仅需微量样本(25-50μL),减少珍贵样本消耗;⑤ 应用广泛:可用于免疫分析、核酸研究、酶学分析等多领域,适配大鼠炎症研究的多种场景。
本服务周期需结合试剂盒货期、样本量及检测排期综合确定,具体流程与时间估算如下:
- 前期沟通(1-2 个工作日):客户提交检测需求(样本类型、数量、分组信息等),技术团队确认样本适用性、预实验方案(如需),明确交付时间;
- 样本接收与质控(1 个工作日):实验室接收样本后,核对样本标签、数量、状态(如是否溶血、是否符合储存要求),确保样本无污染、无降解;
- 实验操作(3-5 个工作日):包含样本前处理(如稀释、离心)、Luminex 检测(标准曲线制备、样本检测、质控品验证)、数据初步分析;
- 报告生成与交付(1-2 个工作日):整理原始数据、计算因子浓度、绘制质控图表,生成包含检测方法、结果、数据分析的详细报告,以邮件或线上平台形式交付客户;
注:若需开展预实验(如确定样本稀释倍数),需额外增加 2-3 个工作日,具体周期可咨询 LabEx 技术支持团队,确保客户及时掌握实验进度。
为保障检测结果准确性,样本收集、处理、储存需遵循以下规范,支持多种样本类型:
- 常规样本:血清(Serum)、血浆(Plasma,需注明抗凝剂类型,如 EDTA、肝素)、细胞上清液、细胞 / 组织裂解液(需使用专用裂解液,避免蛋白酶污染);
- 特殊样本:脑脊液(Cerebrospinal Fluid)、支气管肺泡灌洗液(Bronchoalveolar Lavage Fluid)、鼻腔灌洗液(Nasal Lavage)、腹腔液(Fluid Peritoneal Fluid)、眼泪、房水、阴道灌洗液等,特殊样本需提前与技术团队沟通处理方案。
- 血清样本:静脉采血后室温静置 30-60 分钟(避免阳光直射),3000g 离心 10 分钟,吸取上清,避免溶血(溶血会释放血红蛋白干扰检测);
- 血浆样本:使用对应抗凝管采血后,立即轻轻颠倒混匀 5-8 次,3000g 离心 10 分钟,吸取上清,避免凝血;
- 细胞上清:细胞培养至对数期,收集上清液,3000g 离心 5 分钟去除细胞碎片,避免反复冻融;
- 组织裂解液:取新鲜组织(重量≥50mg),加入预冷的 RIPA 裂解液(含蛋白酶抑制剂),匀浆后 4℃裂解 30 分钟,12000g 离心 15 分钟,吸取上清。
- 样本标记:每个样本管需清晰标记样本编号、来源(如 “大鼠炎症模型组 - 1”)、收集日期、处理方式(如 “血清 - EDTA 抗凝”),避免混淆;
- 短期储存(≤7 天):4℃冰箱冷藏,避免反复开关冰箱;
- 长期储存(>7 天):-80℃超低温冰箱冷冻,避免 - 20℃储存(易导致蛋白变性),且冻融次数不超过 3 次,建议分装为 100-200μL / 管,单次检测使用一管。
为确保检测结果可靠,实验全程设置多维度质控环节,具体如下:
- 标准曲线质控:每个检测批次制备标准曲线,确保相关系数 R²≥0.99,标准品各浓度点回收率在 85%-115% 之间,保证检测线性范围准确;
- 空白对照与阴性对照:设置空白对照(仅检测缓冲液)排除试剂污染,阴性对照(已知无目标因子的样本)验证无交叉反应;
- 质控品验证:每批次检测加入低、中、高三个浓度的质控品,确保质控品检测值在说明书参考范围内,批内 CV 值 < 10%,批间 CV 值 < 15%;
- 样本重复性验证:对随机选取的 10% 样本进行重复检测,确保两次检测结果的相对偏差 < 15%,避免操作误差;
- 数据审核:检测完成后,技术团队对原始数据、质控图表进行双重审核,异常数据需重新检测验证,确保交付数据可直接用于科研分析。
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