- ￥880
- BNCC
- BNCC359027
- 2025年08月19日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
见包装
- 保质期：
见包装
- 英文名：
Escherichia coli Stbl3(pBI121)
- 库存：
现货
- 供应商：
广州市左克生物
- 规格：
冻干粉
产品简介:
品牌：BNCC
货号：BNCC359027
产品名称：Stbl3（含pBI121质粒）大肠杆菌
规格：冻干粉
品牌介绍:
北纳生物是一家专注于细胞、微生物菌种领域,集研发、生产和销售为一体的生物高科技企业,设有细胞库、微生物菌种库,细胞培养、菌种培养、分子生物学实验等实验室,全方位满足您的需求。
说明：1、细胞&菌种等产品规格有多种时，默认发第一种规格，不同规格价格不同，具体找客服联系； 2、北纳细胞&菌种货期可参考：冻存细胞现货当天可发出。复苏细胞需要7-15个工作日；菌种一般默认发冻干粉；其他如菌液或者平板等形式需要7-15个工作日。
订购须知:
1）所有产品仅可用于科研目的的生物学实验（forresearchuseonly），严禁用于人体或动物的医疗目的
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文献和实验系列）：高拷贝会导致大片段质粒复制压力大，易丢失或断裂，优先用低拷贝载体（如 pACYC184，拷贝数 10-15）或大片段专用载体（如 BAC 载体 pBeloBAC11，可容纳 100kb 以上片段，在大肠杆菌中稳定存在）； ④选择合适的连接方法，比如 Gibson 组装（无缝克隆）的方法更适合 10-20kb 大片段的连接，相比传统的 T4 连接的方法，成功率更高，操作更简便； ⑤选择重组缺陷型感受态，提高大质粒的转化效率，如 Stbl3、DH10B 等，此外转化方式也会影响转化
短片段（5kb 以内）的序列克隆成功率。对于提高大片段克隆的成功率，可以从以下几方面考虑： ①选择合适的克隆载体，例如 pCC1-Brick 等适合装载大片段的载体； ②选择合适的克隆方法，通常无缝克隆技术如 Gibson 组装或者 Golden Gate 克隆对于大片段的组装效率更高； ③选择合适的纯化方式，纯化目的基因片段和线性化载体片段后再使用，并且注意两者的使用比例； ④选择合适的大肠杆菌感受态细胞，例如 stbl3，JM109 等； ⑤挑选单克隆菌落时需要注意，成功重组大片段的阳性单克
，但若明确其中主要试剂的作用，所提取的质粒DNA 的纯度及质量会更高。笔者通过不同的试剂进行摸索，现将结果报告如下。1 材料和方法1. 1 材料1. 1. 1 实验菌株 使用菌株为大肠杆菌DH5α，菌株内含质粒pB I121，该质粒上克隆一h IL212基因。1. 1. 2 主要试剂 氨苄青霉素、RNaseA购自华美生物工程公司; DL15000、DL2000核酸分子量标记购自TAKARA公司;其它各种常规化学试剂均为分析纯。1. 2 方法1. 2. 1 质粒DNA的提取[ 1 ] 采用4种不同
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