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- 文献和实验
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2-8度
- 保质期:
见说明书
- 供应商:
信帆生物
- 规格:
1ml
规格:1ml
分类:PCR相关
储存条件和保质期:-20℃,12个月
用途:是即用型的荧光PCR 预混合溶液,是多重探针法荧光 PCR,含有 HS Taq DNA Polymerase、dNTP混合物、MgCl2以及核心稳定剂构成的缓冲体系。其中HS Taq DNA Polymerase 是一种耐受血液及其它抑制物的热启动 DNA 聚合酶,在配套的缓冲环境下,具备良好的扩增灵敏度和特异性。反应时只需加入引物、探针和模板即可进行扩增
注意事项:(1)使用前务必充分混匀,避免剧烈震荡产生过多气泡。 (2)引物:引物不局限于单条引物,可多条引物同时添加进行多重PCR,通常每条引物终浓度可以根据情况在100-500nM间进行调整; (3)探针:探针可包含多条不同荧光信号的探针,每条探针的浓度可根据具体情况在50-250 nM间调整; (4)模板:qPCR灵敏度极高,建议将模板进行稀释使用。若模板为cDNA原液,则模板体积不超过总体积的1/10; (5)反应体积:推荐使用25 uL、30 uL或50 uL,以保证目的基因扩增的有效性和重复性;
货期:现货
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文献和实验【资源】一种被广泛用于实时定量 PCR 的绿色荧光 DNA 染料
hotstart DNA 聚合酶。因此,与其他商业化的master mix 产品相比,Fast-Plus EvaGreen® qPCR Master Mix 可以为客户带来更为精确的实验结果。? EvaGreen®Dye:EvaGreen®是Biotium公司的DNA结合染料,它是一种同时适用于实时 PCR 和 高分辨率熔解曲线(HRM)分析的新一代染料。这种染料通过一种被称为“按要求释放”的全新机制,选择性的结合双链DNA。这一机制保证了较低的 PCR 抑制作用,同时也允许在染料饱和浓度以下进行高分辨率熔解
倍数倍感无助?……尽量选择 Ct 值落在 15-28 范围的稀释倍数作为原始模板稀释度。反应体系与次数推荐 20 μl 体系,Vazyme ChamQTM/AceQ? QPCR Master Mix 5 ml 可供 20 μl 体系 500 次反应。伙伴们问:那用 10 μl、25μl、50 μl 体系可以吗?小 V 回答:可以,可以,必须可以!Vazyme ChamQTM/AceQ? QPCR Master Mix 系 2×预混 Mix,推荐体系 20 μl,只要是等比例放大或缩小体系,实验就能得到保证
体系对PCR扩增的影响1、DNA模板:纯度 蛋白、多糖、酚类等抑制PCR反应 完整性 模板降解会导致PCR扩增无产物 浓度 浓度适当2、引物设计 长度适当、避免二级结构和二聚体 合成质量 浓度 50uL体系引物加量为10-20 pmol3、反应BufferpH、盐离子、稳定剂、增强剂 提供缓冲环境4、Mg 2+浓度过高非特异性严重 过低无扩增产物5、dNTP Mixture浓度适当,避免反复
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