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- GEMIC
- 国产
- XFZ5241
- 2025年08月18日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
2-8度
- 保质期：
见说明书
- 供应商：
信帆生物
- 规格：
5×1ml
规格：5×1ml
分类：PCR相关
储存条件和保质期：-20℃，12个月
用途：是即用型的荧光PCR 预混合溶液，含有 HS Taq DNA Polymerase、dNTP混合物、MgCl2以及核心稳定剂构成的缓冲体系。其中HS Taq DNA Polymerase 是一种耐受血液及其它抑制物的热启动 DNA 聚合酶，在配套的缓冲环境下，具备良好的扩增灵敏度和特异性。反应时只需加入引物、探针和模板即可进行扩增
注意事项：（1）使用前务必充分混匀，避免剧烈震荡产生过多气泡。 （2）引物：引物不局限于单条引物，可多条引物同时添加进行多重PCR，通常每条引物终浓度可以根据情况在100-500nM间进行调整； （3）探针：探针可包含多条不同荧光信号的探针，每条探针的浓度可根据具体情况在50-250 nM间调整； （4）模板：qPCR灵敏度极高，建议将模板进行稀释使用。若模板为cDNA原液，则模板体积不超过总体积的1/10； （5）反应体积：推荐使用25 uL、30 uL或50 uL，以保证目的基因扩增的有效性和重复性；
货期：现货
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文献和实验一般来讲，进行real-time qPCR MasterMix都是2×的浓缩液，只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR灵敏度高，所以每个样品至少要做3个平行孔，以防在后面的数据分析中，由于Ct相差较多或者SD太大，无法进行统计分析。通常来讲，反应体系的引物终浓度为100-400mM；模板如果是总RNA一般是10ng-500，如果cDNA，通常情况下是1ul或者1ul的10倍稀释液，要根据目的基因的表达丰度进行调整。当然这些都是经验值，在操作过程中，还需要根据所用
成功做完了逆转录，这时候可能有些疲累了。筛引物、做定量的时候要加样的孔也较多，即使使用了 qPCR 预混液，也有加错样的可能发生。诺唯赞的 ChamQTM SYBR® Color qPCR Master Mix 系列（Q411 /Q421 /Q431 /Q441）提供不同颜色的试剂，利用移液过程中的变色效应，追踪移液过程，可以极大的减少移液错误。 引物设计有原则 在使用 SYBR 染料法时，引物设计需遵循以下原则：引物长度 18～25bp，产物长度 80～300bp，GC 含量 40～60
Real-time qPCR 手册——手把手教你从菜鸟到高手
NaOH 中浸泡 10 分钟，用水彻底漂洗干净后高压灭菌备用。 当然，这些也不是绝对的要求。如果是操作熟练。完全可以用初次开封的离心管和枪头，新过滤的超纯水，进行 RNA 的提取。 2. Mix 配制 一般来讲，进行 real-time qPCR MasterMix 都是 2×的浓缩液，只需要加入模板和引物就可以。由于 real-time qPCR 灵敏度高，所以每个样品至少要做3 个平行孔，以防在后面的数据分析中，由于 Ct 相差较多或者 SD 太大，无法进行统计分析。通常来讲，反应
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