pT7-6×His-PGRMC1(human)-6×His(

差异基因研究技术及其应用

PCR,DD-PCR） 利用可以扩增所有哺乳类mRNA的几条5′特定引物和几条3′锚定引物随机组合，将cDNA进行PCR扩增，这样对于相同的cDNA，PCR产物的种类多少和分布应该是完全一样的，而对于不同的cDNA则可以找到差异条带，它们所代表的cDNA就有可能与细胞状态的改变或疾病状态相关。差异显示PCR方法具有快速、所需RNA量少、可同时显示多种生物性状的差异及可以同时获得高表达和低表达的基因等诸多优点；但假阳性率高，可高达70%的假阳性条带［7］；不能反映低拷贝mRNA的差异，对高拷贝

荧光原位杂交技术检测植物基因组中整合的转基因片段

与携带目标位点染色体的两个染色单体进行可靠的杂交；否则，只有统计分析几个细胞间期的结果，才能识别杂交探针的位点。检测和鉴定转基因的染色体位点 [17~20 ,  30 ]，或整合到寄主基因组的病毒序列[21~23 ] , 其情况是极其独特的，因此，需要付出更多的努力去调整 FISH 技术，以分析低拷贝或单拷贝序列，其原因如下。 首先，通过 Southern 杂交或 PCR 方法，确切地验证某一外源 DNA 分子是否已经整合到基因组中是非常困难的，有时甚至是不可能做的；第二，采用图位法定位染色

M13 噬菌体衣壳蛋白改造在改良噬菌体展示技术中的应用

蛋白 [ 蛋白质 -3 ( P3 ) ] 形成的融合蛋白在 M13 噬菌体表面以低拷贝方式展示，这需要在野生型（wt)  P8 和 P3 辅助噬菌体帮助的条件下进行 [5] 。由于融合蛋白的展示水平随蛋白质序列和长度的不同而不同，多价蛋白与 P8 融合进行展示难以实现 [6] 。例如，如果 P8 的每一个拷贝都与展示多肽形成融合蛋白（噬菌体系统，而不是噬菌粒系统），融合多肽长度超过6 个氨基酸残基，噬菌体一般就会不稳定 [7] 。即使在噬菌粒系统中，蛋白质展示也高度依赖于蛋白质的大小和性质 [8]。尽管用