凡士林，AB64826-500g

庖肉培养基

成分 　　牛肉浸液　　　　　　　1000mL 　　蛋白胨　　　　　　　　30g 　　酵母膏　　　　　　　　5g 　　磷酸二氢钠　　　　　　5g 　　葡萄糖　　　　　　　　3g 　　可溶性淀粉　　　　　　2g 　　碎肉渣适量 　　pH7.8 制法 　　1　称取新鲜除脂肪和筋膜的碎牛肉500g，加蒸馏水1000mL和1mol/L氢氧化钠溶液25mL，搅拌煮沸15min，充分冷却，除去表层脂肪，澄清，过滤，加水补足至1000mL。加入除碎肉渣外的各种成分

厌氧微生物的培养

酸反应物切勿与培养基表面接触，以溶化的石蜡凡士林液（即vaspar）密封皿底与玻璃板或皿盖的接触处。置30℃温箱培养。 　　 2．疱肉培养基法 　　（1）取已除去筋膜、脂肪的牛肉500g，切成小方块，置1000ml蒸馏水中，以小火煮1小时，用纱布过滤，挤干肉汁，将肉汁保留备用。再将肉渣用绞肉机绞碎，或用刀切碎，最好使其成细粒。 　　（2）将保留的肉汁加蒸馏水，使总体积为2000ml，加入20g蛋白陈，2g葡萄糖，5gNaCl和绞碎的肉渣。置烧瓶中摇均匀，加热

[转帖]蛋白质体外磷酸化的操作步骤及一点点体会

：1、 蛋白准备表达GST融合蛋白，用亲和层析纯化好，理论上越纯越好，但如果能够用20x40cm的SDS-page胶能分得很开就可以了。然后用1x的磷酸化buffer透析过夜（4度），再测好浓度定量总蛋白。分装10ug/管，保存到-80度备用。2、 配制SDS-Page胶用20x40cm的胶配两层胶：分离胶和积成胶（参考精编分子实验指南第二版p330页），先配12%的分离胶，灌胶以后用水封胶（如果是用凡士林封的胶室则不能用正丁醇封胶，因为是有机溶剂会溶掉凡士林，配胶不会成功,这一步我可是摸了三次