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文献和实验完整性分析。 二、基因组 DNA 的去除 某些情况下，痕量基因组 DNA（gDNA）可能与 RNA 共同被纯化。污染 gDNA 可能会干扰反转录结果，导致 RT-qPCR 等高灵敏度实验出现假阳性、高背景或检测率降低。 为去除 gDNA，通常在 RNA 分离过程中加入 DNase I。在进行 RT-(q)PCR 之前，必须完全去除 DNase I，因为任何残留的酶都会使单链 DNA（如引物和 cDNA）降解。通常，DNase I 失活（如，EDTA 和加热处理）或酶去除步骤会导致 RNA
℃（一般正常qPCR产物，大小在100-300bp之间，熔解曲线Tm大多在80℃以上），可能是引物二聚体导致，可进一步优化引物。 ②有Ct值且＜35，表示反应体系被污染，可逐步排除污染源。 2）NRC有扩增 NTC正常，NRC有Ct值，可能是RNA含有gDNA污染。建议用DNase I消化或使用含有gDNA去除的反转录试剂盒（如Yeasen Cat#11157ES）。 6.扩增曲线平台期下降 可能原因与解决方案： 基线范围设置太高，这种一般是由于模板量过高导致的。建议减小基线
NAR新突破：CliPEdit调控RNA功能与m⁶A甲基化，翌圣试剂助力
® Flash Cell/Tissue Total RNA Kit 快速细胞/组织总 RNA 提取试剂盒 19221ES 反转录 5 min高效高产反转 预混液(含gDNA去除) Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (DNA digester plus) 11155ES qPCR染料法 高灵敏显色示踪荧光定量预混液 Hieff UNICON® ColorGPS
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