酸性乙醇洗液，AB64033-500ml

小鼠腹水及单细胞悬液制备及注意事项

加入适量红细胞裂解液裂解红细胞（可加入 500 μL 1× 红细胞裂解液重悬细胞，室温裂解 2 min 后，立马加入 10 mL PBS，300 g 离心 5 min 后弃上清）。 若提取的腹腔巨噬细胞需培养，请注意无菌操作。 收集腹水时，从小鼠左侧（肠道较多）注射 PBS，从右侧（器脏较大）抽腹腔灌洗液，注意不要扎到器脏。 小鼠腹腔灌洗液收集细胞比较脆弱，加细胞染色缓冲液有利于细胞的保存，但建议当天及时检测。 小鼠腹腔灌洗液中大多数为巨噬细胞，巨噬细胞检测需要封闭Fc受体，此时可使用小鼠 CD16/32纯

Elabscience|肺泡巨噬细胞研究必看：LPS诱导急性肺炎模型制备与检测全攻略

s-1 min，确保液体充分进入下呼吸道，继续培养小鼠24 h。 2. 肺泡灌洗液的制备 （1）将正常小鼠和急性肺炎小鼠分别麻醉后，仰卧固定，充分暴露颈部和胸部区域，做好操作区域的消毒处理。 （2）用眼科剪在小鼠颈部正中做长约1 cm的切口，逐层分离皮肤、皮下组织和肌肉，暴露白色气管。 （3）将1 mL注射器连接气管插管（26G头皮针），针头平行插入气管内，插入深度控制在0.8-1 cm。 （4）缓慢推注PBS（2 mM EDTA+1% BSA），剂量为0.5-1 mL/次（可根据小鼠体重灵活调整

【建议】关于如何提蛋白质纯化问题（附例）

8.0，20mMTris，0.5N NaCl，8M尿素，40mM 咪唑 柱洗脱液：如pH8.0，20mMTris，0.5N NaCl，8M尿素，200mM 咪唑 柱洗脱方法：如分段洗脱，线性梯度洗脱等 3、建议说明纯化规模和纯化设备，例如： 一次纯化所用的菌体量：如10g湿菌体或500ml摇瓶发酵菌等 破菌缓冲液体积：如150ml 包涵体洗涤，溶解液体积：包涵体洗涤液每次150ml，共洗涤3次；包涵体用50ml包涵体溶解液溶解，搅拌过夜 纯化用柱类型：如XK26/20、或自制、或国产16