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- 详细信息
- 文献和实验
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- 保存条件:
RT
- 库存:
99
- 供应商:
鹿森生物
- 规格:
500ml
纯度:3%
保存温度:RT
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文献和实验加入适量红细胞裂解液裂解红细胞(可加入 500 μL 1× 红细胞裂解液重悬细胞,室温裂解 2 min 后,立马加入 10 mL PBS,300 g 离心 5 min 后弃上清)。 若提取的腹腔巨噬细胞需培养,请注意无菌操作。 收集腹水时,从小鼠左侧(肠道较多)注射 PBS,从右侧(器脏较大)抽腹腔灌洗液,注意不要扎到器脏。 小鼠腹腔灌洗液收集细胞比较脆弱,加细胞染色缓冲液有利于细胞的保存,但建议当天及时检测。 小鼠腹腔灌洗液中大多数为巨噬细胞,巨噬细胞检测需要封闭Fc受体,此时可使用小鼠 CD16/32纯
8.0,20mMTris,0.5N NaCl,8M尿素,40mM 咪唑 柱洗脱液:如pH8.0,20mMTris,0.5N NaCl,8M尿素,200mM 咪唑 柱洗脱方法:如分段洗脱,线性梯度洗脱等 3、建议说明纯化规模和纯化设备,例如: 一次纯化所用的菌体量:如10g湿菌体或500ml摇瓶发酵菌等 破菌缓冲液体积:如150ml 包涵体洗涤,溶解液体积:包涵体洗涤液每次150ml,共洗涤3次;包涵体用50ml包涵体溶解液溶解,搅拌过夜 纯化用柱类型:如XK26/20、或自制、或国产16
次使用前请先在漂洗液RW瓶加入指定量无水乙醇! ♦ 操作前在裂解液RLT中加入β-巯基乙醇至终浓度1%,如1 ml RLT 中加入10μl β-巯基乙醇。此裂解液最好现用现配。配好的RLT 4℃可放置一个月。 1. 直接研磨法(推荐): a. 新鲜植物组织称重后取100mg迅速剪成小块放入研钵(冰冻保存或者液氮保存样品可直接称重后取100mg放入研钵), 加入10体积(1ml)RLT(请确定已加入β-巯基乙醇)和1体积(100μl) PLANTaid 室温下充分研磨成匀浆,注意应该迅速研磨
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