M2培养基，AB64424-100ml

Elabscience|巨噬细胞极化总失败？RAW264.7/THP-1/BMDM/hMDM四大模型避坑指南与实操全攻略

检测。 M2极化：弃去旧培养基，换为无血清培养基饥饿处理16-20 h；再更换为新鲜全培养基静息培养24 h；最后加入IL-4和IL-13（50-100 ng/mL）诱导培养24-48 h，完成M2极化。 流式检测： （1）收集细胞悬液，150 × g离心3 min； （2）弃上清，加入Cell Staining Buffer或PBS缓冲液重悬细胞沉淀，调整细胞密度为1-10×106/mL; （3）取100 μL细胞悬液，每组加入2 μL Purified Anti-Mouse CD

Elabscience | BV2细胞M1极化造模与流式检测，这份Protocol请收好

2细胞系提供了高度均一的细胞群体，消除了个体差异和分离纯化过程中的批次效应，确保实验结果具有良好的可重复性[7]。 四、BV2细胞极化培养及流式检测流程 1. 通用准备 BV2细胞复苏、传代扩增至对数生长期。消化收集细胞（BV2细胞贴壁较松，胰酶消化时间不宜过长，需轻柔吹打），调整细胞密度至合适浓度（建议5×10⁵个/mL），铺板于合适培养板，使用完全培养基（含10%FBS的高糖DMEM）进行培养，于37°C、5% CO₂培养箱中贴壁过夜。 2. M1极化 弃去旧培养基，更换为含LPS（100 ng

大神教你瞬时转染快，准，狠！

板液体每孔在 2ml 左右，不宜太多，或者太少。取两个 1.5mlEP 管，记为 A 管，B 管，每个 EP 管加入 250ul Opti-MEM I，然后 A 管加入 5-10ul lipofectamine 2000，B 管加入 100pM-200pM 的 siRNA（见买来的 siRNA 说明书），然后静置 5min，混合在一起，静置 20min，用 AB 混合液加入到 1.5ml 的无血清培养基 C 内，混匀； 将六孔板里的细胞的液体吸出，用 PBS 清洗两遍； 将 ABC 混合液 2ml