5×蛋白上样缓冲液（含DTT），AB64393-10ml

免疫共沉淀实验指南

-PAGE 电泳分析检测结果。这种方法得到的目的蛋白 N是在细胞内与蛋白 M 天然结合的，符合体内实际情况，得到的结果可信度高。这种方法常用于测定两种目标蛋白是否在体内结合；也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。 步骤 用预冷的 PBS 溶液洗涤贴壁细胞两次（对于悬浮细胞则用台式离心机以 800-1000 rpm 转速通过离心洗涤）。 加入预冷的 RIPA 液（含蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂），RIPA 液的用量：按照 0.5 mL 每 5×106 细胞计算。 注：悬浮细胞，收集

小鼠腹水及单细胞悬液制备及注意事项

科镊子提起腹膜，用 5mL 注射器往小鼠腹腔注射 2.5mL 预冷 PBS（勿扎到脏器），轻揉小鼠腹部1~2 min。注射器回抽腹腔灌洗液，收集于15mL 离心管中。 重复第 5 步 5 次，冲洗腹腔，可观察到冲洗液逐渐澄清。 将收集的腹腔灌洗液 300 g 离心 5 min，弃上清。 用细胞染色缓冲液或者含 10% 胎牛血清的 1640 培养液重悬细胞。 进行细胞计数，并调整细胞浓度至 1×107/mL。 注意事项： 若第 7 步离心弃上清后发现细胞沉淀中有较多红细胞，且检测目的细胞非红细胞，先

【资源】电泳相关溶液配制==2D 双向凝胶电泳

1、 水化上样缓冲液（ I ） : 尿素 8M 4.805g CHAPS 4% 0.4g DTT 65mM 0.098g （现加） Bio-Lyte 0.2%(w/v) 50 m l （ 40% ）（现加） 溴酚蓝 0.001% 10 m l （ 1% 溴酚蓝） MilliQ 水 定容至 10ml 分装成 10 小管，每小管 1ml ， -20 ℃冰箱保存。 2、水化上样缓冲液（ II ）: 尿素 7M 4.2g 硫脲 2M 1.52g CHAPS 4% 0.4g