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鹿森生物
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500ml
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文献和实验板液体每孔在 2ml 左右,不宜太多,或者太少。取两个 1.5mlEP 管,记为 A 管,B 管,每个 EP 管加入 250ul Opti-MEM I,然后 A 管加入 5-10ul lipofectamine 2000,B 管加入 100pM-200pM 的 siRNA(见买来的 siRNA 说明书),然后静置 5min,混合在一起,静置 20min,用 AB 混合液加入到 1.5ml 的无血清培养基 C 内,混匀; 将六孔板里的细胞的液体吸出,用 PBS 清洗两遍; 将 ABC 混合液 2ml
进行梳理和指导。 一、细胞复苏 1.【准备工作】配制完全培养基:MEM改良Eagle培养基(abs9467-500ml/SV30308.01)+10%FBS(abs972-500mL/SV30302.03)+1%P/S(abs9244-100ml/SV30010),取9mL完全培养基于37℃预热。水浴锅预热至37℃;生物安全柜紫外照射30min。 2.【融化】从液氮/冰箱取出冻存管,37℃水浴快速摇晃融化,约1-2min。 3.【重悬】75%酒精擦拭冻存管外壁,安全柜内开盖,将细胞悬液沿管壁缓慢
BRL 3A 源自Buffalo rat的正常肝脏组织,是BRL细胞的单克隆亚株,呈成纤维样贴壁生长,该细胞增殖较快,可分泌增殖刺激活性因子MSA,常用于生长因子及肝脏细胞生物学、肝脏代谢、药物肝毒性评价研究。该细胞贴壁较牢,对培养基与胰酶消化条件有一定要求,传代操作中需严格把控。 一、细胞复苏 1.【准备工作】水浴锅提前预热至37℃;准备含10%FBS的完全培养基:MEM改良Eagle培养基(abs9467-500ml/SV30308.01)+10% FBS(abs972-500mL/SV
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