MEM，AB63703-500ml

大神教你瞬时转染快，准，狠！

板液体每孔在 2ml 左右，不宜太多，或者太少。取两个 1.5mlEP 管，记为 A 管，B 管，每个 EP 管加入 250ul Opti-MEM I，然后 A 管加入 5-10ul lipofectamine 2000，B 管加入 100pM-200pM 的 siRNA（见买来的 siRNA 说明书），然后静置 5min，混合在一起，静置 20min，用 AB 混合液加入到 1.5ml 的无血清培养基 C 内，混匀； 将六孔板里的细胞的液体吸出，用 PBS 清洗两遍； 将 ABC 混合液 2ml

BRL 3A细胞培养保姆级SOP及注意事项

BRL 3A 源自Buffalo rat的正常肝脏组织，是BRL细胞的单克隆亚株，呈成纤维样贴壁生长，该细胞增殖较快，可分泌增殖刺激活性因子MSA，常用于生长因子及肝脏细胞生物学、肝脏代谢、药物肝毒性评价研究。该细胞贴壁较牢，对培养基与胰酶消化条件有一定要求，传代操作中需严格把控。 一、细胞复苏 1.【准备工作】水浴锅提前预热至37℃；准备含10%FBS的完全培养基：MEM改良Eagle培养基（abs9467-500ml/SV30308.01）+10% FBS（abs972-500mL/SV

小鼠腹水及单细胞悬液制备及注意事项

加入适量红细胞裂解液裂解红细胞（可加入 500 μL 1× 红细胞裂解液重悬细胞，室温裂解 2 min 后，立马加入 10 mL PBS，300 g 离心 5 min 后弃上清）。 若提取的腹腔巨噬细胞需培养，请注意无菌操作。 收集腹水时，从小鼠左侧（肠道较多）注射 PBS，从右侧（器脏较大）抽腹腔灌洗液，注意不要扎到器脏。 小鼠腹腔灌洗液收集细胞比较脆弱，加细胞染色缓冲液有利于细胞的保存，但建议当天及时检测。 小鼠腹腔灌洗液中大多数为巨噬细胞，巨噬细胞检测需要封闭Fc受体，此时可使用小鼠 CD16/32纯