OPTI MEM I 100ML（转染用）

OPTI-MEM进行贴壁细胞培养的实验方法

清培养基OPTI-MEM(GIBICO) 5、转染级质粒 二、实验步骤 invitrogen的LIPOFECTAMINE 2000说明书上列举了24孔、12孔、6孔......板的实验体系，因为需要转染的细胞量大，所以一直采用的是6孔版做的转染。以下是以6孔板为例说明一下我的体系和方法吧! 1、转染前一天，以合适的细胞密度接种到6孔培养板上。(我的接种密度是3~4*105/ml.)转染时，细胞要达到90~95%的融合。 2、溶液1：240ul 无血

大神教你瞬时转染快，准，狠！

板液体每孔在 2ml 左右，不宜太多，或者太少。取两个 1.5mlEP 管，记为 A 管，B 管，每个 EP 管加入 250ul Opti-MEM I，然后 A 管加入 5-10ul lipofectamine 2000，B 管加入 100pM-200pM 的 siRNA（见买来的 siRNA 说明书），然后静置 5min，混合在一起，静置 20min，用 AB 混合液加入到 1.5ml 的无血清培养基 C 内，混匀； 将六孔板里的细胞的液体吸出，用 PBS 清洗两遍； 将 ABC 混合液 2ml

MEM培养基的配制步骤

g)，HEPES(2.383,10mmol)、非必需氨基酸(可不加，10ml)。 4.加抗生素：一般抗生素终浓度——青霉素100U/ml，链霉素100U/ml。1L加入10m储备液。 5.调pH值：加水到1000ml，然后用HCL或者NaOH调节pH到7.2. 6.过滤除菌：采用0.22um滤膜。过滤后分装于小瓶中(100或200ml)。过滤后pH值一般上升0.1-0.3. 7.加小牛血清：根据培养基配置的量将小牛血清分装，冷冻保存(-20度)。临用前将加入小牛