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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
见包装
- 保质期:
见包装
- 英文名:
OPTI MEM I 100ML(转染用)
- 库存:
999
- 供应商:
博奥派克
- 规格:
100ml
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文献和实验清培养基OPTI-MEM(GIBICO) 5、转染级质粒 二、实验步骤 invitrogen的LIPOFECTAMINE 2000说明书上列举了24孔、12孔、6孔......板的实验体系,因为需要转染的细胞量大,所以一直采用的是6孔版做的转染。以下是以6孔板为例说明一下我的体系和方法吧! 1、转染前一天,以合适的细胞密度接种到6孔培养板上。(我的接种密度是3~4*105/ml.)转染时,细胞要达到90~95%的融合。 2、溶液1:240ul 无血
g),HEPES(2.383,10mmol)、非必需氨基酸(可不加,10ml)。 4.加抗生素:一般抗生素终浓度——青霉素100U/ml,链霉素100U/ml。1L加入10m储备液。 5.调pH值:加水到1000ml,然后用HCL或者NaOH调节pH到7.2. 6.过滤除菌:采用0.22um滤膜。过滤后分装于小瓶中(100或200ml)。过滤后pH值一般上升0.1-0.3. 7.加小牛血清:根据培养基配置的量将小牛血清分装,冷冻保存(-20度)。临用前将加入小牛
板液体每孔在 2ml 左右,不宜太多,或者太少。取两个 1.5mlEP 管,记为 A 管,B 管,每个 EP 管加入 250ul Opti-MEM I,然后 A 管加入 5-10ul lipofectamine 2000,B 管加入 100pM-200pM 的 siRNA(见买来的 siRNA 说明书),然后静置 5min,混合在一起,静置 20min,用 AB 混合液加入到 1.5ml 的无血清培养基 C 内,混匀; 将六孔板里的细胞的液体吸出,用 PBS 清洗两遍; 将 ABC 混合液 2ml
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