Ⅱ型胶原酶消化液

正常骨内成骨细胞原代培养

实验材料： 1. 骨组织来源：新生或胚胎大鼠、兔、人类胚胎或手术切除之骨组织； 2. 清洗液：不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2； 3. 消化液：0.25%胰蛋白酶溶液，1mg/mlⅡ型胶原酶溶液； 4. 培养液：RPMI 1640培养基，配制培养液时加入15%的小牛血清，并用5.6% NaHCO3 调节至pH 7.2。 实验方法： 1. 取生后1—2d大鼠若干只，拉颈处死

鸡卵泡颗粒细胞分离、培养

1.实验动物 产蛋期母鸡（动物实验中心购买），普通饲料喂养，自由进食进饮；实验前禁食12h 2.主要试剂及仪器 EDTA-2Na购自国药集团化学试剂有限公司；双抗购自Hyclone公司；M199培养基、胎牛血清及Ⅱ型胶原酶均购自美国Gibico 公司；CO2恒温培养箱购自美国Thermo公司 3.实验步骤 A. 翅下静脉注射2mL EDTA-2Na（W/V，2%）溶液处死母鸡，新洁尔灭消毒液浸泡消毒5min，打开腹腔，剪取整个卵巢，小心剥离卵泡（以8-15g为最佳），置于装有PBS

兔膀胱平滑肌细胞的分离、培养和鉴定

肌细胞的纯度几乎99%。结论：该方法易行、可靠、在短期内可获得大量高纯度膀胱平滑肌细胞。二、材料及方法 1、试剂及标本成同龄雄性新西兰白兔2只，体重约2.5~3k(购于南京军区南京总医院动物实验中心)，一只为正常成年雄性新西兰白兔，一只为膀胱出口不全梗阻8周成年雄性新西兰白兔。DMEM、Ⅱ型胶原酶及α-肌动蛋白抗体（α-actin）购于北京华美公司；胎牛血清购于杭州四季青公司；胰蛋白酶购于南京生兴公司。2、 膀胱平滑肌细胞酶法分离肌注盐酸氯胺酮200mg及氟哌利多5mg麻醉，待兔进入麻醉状态后消毒，下腹