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- 详细信息
- 文献和实验
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- 保存条件:
-80℃
- 保质期:
6个月
- 英文名:
末端脱氧核苷酸转移酶
- 库存:
询问
- 供应商:
广州市左克生物
- 规格:
20U/μL,500 μL
产品简介:
品牌:Keygen/凯基生物
货号:KGD1301-500
产品名称:末端脱氧核苷酸转移酶
规格:20U/μL,500 μL
保质期:6个月
储存温度:-80℃
运输条件:干冰运输
品牌介绍:
江苏凯基生物技术股份有限公司,是一家深耕生命科学工具产品与服务、聚焦细胞生物学试剂产品、具备诊断产品临床、注册到商业转化能力的生命科学品牌供应商,依托细胞生物学、蛋白与免疫、分子生物学等关键核心技术,已形成完整的自主开发与产销体系,部分生物核心原材料“自主可控”,拥有知识产权90余项,通过ISO9001质量管理体系认证、ISO13485质量管理体系认证、GB/T29490知识产权管理体系认证,是国家专精特新小巨人企业、国家高新技术企业、国家科技部国际合作示范基地、江苏省科技型企业、江苏省生物试剂关键原料工程技术研究中心、江苏省生物医药核心材料绿色制造基地、江苏省服务型制造示范企业。明星产品线包括细胞培养基、无血清冻存液、细胞凋亡、细胞增殖检测试剂盒等。
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文献和实验(一)原理 凋亡细胞是由于内源性核酸内切酶的激活后,将DNA 切割成许多双链DNA 片段以及高分子量DNA 单链断裂点(缺口),暴露出大量3- 羟基末端,如用末端脱氧核苷酸转移酶(TdT )将标记的dUTP 进行缺口末端标记,则可原位特异地显示出凋亡细胞。主要应用的是荧光标记法和酶标记法。 (二)荧光标记法 1 .材料与试剂 采用德国Boehringer-Mannheim 公司In Situ Cell
原位末端转移酶标记技术 (ISEL)检测细胞凋亡 根据细胞凋亡时核酸内切酶被激活,将细胞核染色体DNA从核小体连接处切断,产生单股或双股DNA链。根据这一生化特性,将外源性核苷酸和酶(末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)和DNA聚合酶I或Klenow大片段)渗入到凋亡细胞中,催化标记的外源性核苷酸与断裂的 DNA链相结合,并通过一定的显示系统显色。 由于凋亡细胞内的内源性核酸酶被激活后,将自身染色体或DNA切割,产生与DNA断裂数目相同
置于湿盒中);同时设立对照: A)阴性对照:每一实验均应设立对照,每孔加50μl标记液(无末端转移酶)代替TUNEL反应混合物; B)阳性对照:每一实验均应设立对照,用微球核酸酶或DNA酶I处理已固定/透化的细胞(1μg~1mg/ml,室温10min),以诱导DNA链断裂。37℃孵育 30min; PBS洗3次; 单个转换和分析:标本吹干,加50μl转换POD(注意要在单层细胞上均匀分布POD,为避免蒸发,将玻片置于湿盒中)37℃ 30min,PBS洗3次,加50~100μl
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