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- 2025年11月19日
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可用于活体脏器多重成像、手术导航、血管成像、淋巴成像、肿瘤成像、炎症检测和监测、药物追踪、活体原位疾病检测等。
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文献和实验经验分享｜动物活体光学成像实验——荧光成像（一）【自发荧光】
动物活体荧光成像实验中，一般利用荧光蛋白选择性地标记目标细胞，或用荧光染料标记药物，再通过活体成像系统进行详细观察。但是在荧光成像过程中，当观察目标的荧光信号微弱时，自身荧光会干扰目标荧光的识别。自发荧光是指由细胞结构或代谢产物等产生的自然荧光。从小分子（糖、脂肪酸、氨基酸、核苷酸、离子和水等）和大分子（蛋白质、磷脂、RNA、DNA 和多糖等）到更大的结构（如细胞器和细胞膜），覆盖了大部分可见光谱范围（400-700 nm）。自发荧光与标记物发射波长重叠的时候，经激发光照射会发射出与标记物相
巴斯的 LMPLFLN 或 SLMPLN 长工作距离物镜比较适合。 6. 需要观察荧光样品，荧光信号亮度如何？ 如果观察的是微弱荧光信号的样品，可以使用能够汇聚更多光线的高数值孔径物镜。奥林巴斯可提供从紫外线（UV）到近红外（NIR）荧光激发的众多品类显微镜物镜。 7. 使用的是多通道还是单通道荧光成像？ 为了补偿色差校正，可以使用不同类型的物镜：消色差物镜，半复消色差物镜和复消色差镜。消色差物镜的校正性能最低，半复消色差物镜（或萤石）可进行额外的球面校正，而复消色差物镜可进行最高级别的色差校正。 如果应用
光蛋白都有其独特的激发波长和发射波长，需匹配荧光成像系统的检测范围。同时检测多种荧光蛋白时，需避免颜色和光波长的冲突。绿色和红色荧光蛋白较为常用。红色或近红外的荧光蛋白更适用于活体成像。 单体性质：荧光蛋白多聚体可能会影响融合蛋白的生物学功能和定位，应尽量选择单体。 亮度：荧光蛋白的亮度值由消光系数与量子产率的乘积计算得出。在许多情况下，将荧光蛋白的亮度与 EGFP（设定为 1）进行比较（表 1），应选择足够亮的荧光蛋白便于检测和成像。 PK 值：每个荧光蛋白都有其最适 pH 值，此时的荧光强度最高。在细胞
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