易洗脱蛋白G-10mg（亲和蛋白系列）

膜蛋白纯化攻略分享

采用亲和加分子筛两种层析方法就能得到大量高纯度的蛋白样品往往是别人家的实验。到自己手上总会有各种惊喜… 今天的主角更加过分，在真正纯化之前就需要我们施展十八般武艺把它从细胞上「拽」下来。 没错，它就是膜蛋白… 人类基因组中，有大约 30% 的基因编码膜蛋白。当今已批准上市的药物中，有超过 50% 以膜蛋白为靶点，然而目前蛋白质结构数据库 (Protein Data Bank, PDB） 中膜蛋白比例不足 1%。 欲了解其功能，必解析其结构。是很多结构生物学家心头的念念不忘，随着冷冻

化学发光羧基磁珠偶联SA和抗体的实验技术指南

，再次旋涡震荡混匀，然后置于37℃环境旋转混匀反应2h。此偶联反应中，抗体与磁珠的比例为1:50，磁珠的终浓度为5mg/mL。   2.5. 偶联反应完成后，将EP管置于磁性分离架上，去除上清，加入封闭液，此时，磁珠的终浓度为5mg/mL，同样置于37℃环境旋转混匀反应1h。   2.6. 封闭完成后，重复2.2步骤，最后将磁珠用保存液保存，此时磁珠的浓度可自定。   四、注意事项 1. 当蛋白浓度≥2mg/mL，会增加磁珠与蛋白的接触面积，使得磁珠在单位面积内捕获相对更多的蛋白

GST－融合蛋白的表达与纯化

原理 GST 纯化系统是利用GST （glutathione-S-transferase ）融合蛋白与固定的谷胱甘肽（GSH）通过硫键共价亲和，通过GSH交换洗脱的原理来进行纯化 。1ml树脂大约可结合5-8 mg融合蛋白，并可反复使用数次。试剂u IPTG（异丙基硫代-β-D-半乳糖苷） 2g IPTG 溶解入10ml 水，过滤除菌，分装，-20℃保存。u Lysis buffer （50ml）1)2.5ml 1 M Tris，pH8.0 2)0.1ml 0.5ml EDTA 3)0.292