生物素化辣根过氧化物酶-100μL（IVD原料）

夹心法 ELISA 操作步骤

内。 生物素化抗体/抗原：弃去液体，甩干，不用洗涤。每个孔中立即加入生物素化抗体/抗原工作液 100 μL，混匀，酶标板加上覆膜， 37℃ 孵育 1 小时。 洗涤：甩尽孔内液体，每孔加洗涤液 350 μL，浸泡 1-2 分钟，吸去或甩掉酶标板内的液体，在厚的吸水纸上拍干。重复此洗板步骤 3 次。提示：此处与其他洗板步骤都可用洗板机。每一步洗涤充分是实验的根本。 HRP 酶结合物：每孔加酶结合物工作液 100 μL，混匀，加上覆膜，37℃ 孵育 30 分钟。 洗涤：弃去孔内液

HRP 底物分类

底物范围较广，包括二氨基联苯胺 (DAB)、氯萘酚和氨乙基咔唑等。 二氨基联苯胺/金属盐 DAB 是辣根过氧化物酶最敏感、常用的底物。它产生强烈的棕色产物，在水和醇中不溶解。多数情况下，推荐在 DAB 中加入不同的金属离子。当加入金属盐如钴、镍至底物液中，辣根过氧化物酶可以更加敏感。此类反应产物呈暗蓝灰色至黑色，且在水及醇中稳定。DAB/金属盐染色应用的组织染色范围较广。 1. 需要的溶液和特殊设备 DAB，0.05 mol/L Tris 缓冲液 (pH7.6), 0.3％ (W

竞争法ELISA操作步骤

实验开始前，各试剂和样本均应平衡至室温；样本复融后需再次离心，取上清检测；试剂或样本配制时，需充分混匀并尽量避免起泡；标曲和样本建议做复孔检测。 加样：将标准品工作液依次加入到前两列孔中，每个浓度的工作液并列加两孔，每孔50 μL。待测样品加入到其他孔，每孔50 μL(若样本浓度高于检测范围，需用标准品&样本稀释液稀释后取样)。立即每孔加入配好的生物素化抗体工作液50 μL。混匀，给酶标板覆膜，37℃孵育45分钟。提示：加样时将样品加于酶标板底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，避免产生