ecadherin蛋白分子量

E-cadherin蛋白分子量的生物学特性与研究意义

 

E-cadherin蛋白分子量约为120 kDa，是一种典型的I型跨膜钙黏附蛋白，在维持上皮细胞间黏附和组织结构完整性中发挥核心作用。该蛋白由CDH1基因编码，其分子量特性直接反映了其复杂的结构域组成：包含一个约100 kDa的胞外域（由五个串联的EC重复结构域构成）、一个约24 kDa的跨膜区以及一个相对较小的约15 kDa的胞内域。值得注意的是，在SDS-PAGE电泳分析中，E-cadherin蛋白分子量常表现为约135 kDa的表观分子量，这种差异主要源于翻译后修饰（如糖基化）导致的迁移率改变。通过质谱jīngquè测定，非糖基化的E-cadherin核心多肽分子量约为88 kDa，而成熟的全长糖蛋白分子量则达到120 kDa左右。

 

E-cadherin蛋白分子量的jīngquè测定对研究其功能调控至关重要。在肿瘤转移研究中，E-cadherin蛋白分子量的异常变化（如蛋白水解产生的片段）常与上皮-间质转化（EMT）过程相关。蛋白水解酶如ADAM10或基质金属蛋白酶切割E-cadherin胞外域产生的80 kDa可溶性片段（sE-cad），以及膜锚定的38 kDa C端片段（CTF），都是重要的生物学标志物。Western blot分析时，使用针对E-cadherin胞内域的抗体会检测到全长120 kDa蛋白及其CTF片段，而胞外域抗体则可识别全长蛋白和sE-cad片段。

 

在实验技术层面，准确测定E-cadherin蛋白分子量需要考虑多种因素。样品制备时需使用含钙离子的缓冲液以维持蛋白构象，避免钙缺失导致的蛋白降解。二维电泳结合质谱（2DE-MS）是分析E-cadherin蛋白分子量异质性的金标准，可区分不同磷酸化和糖基化修饰的亚型。具体费用需要根据实验需求和样品情况来确定。近年发展的表面等离子共振（SPR）技术不仅能测定分子量，还可实时监测E-cadherin同源二聚体（分子量约240 kDa）的形成动力学。

 

E-cadherin蛋白分子量的研究对理解多种病理过程具有重要意义。在遗传性弥漫型胃癌（HDGC）中，CDH1基因截短突变常导致分子量显著减小的异常蛋白产物。而在炎症性肠病中，E-cadherin蛋白分子量的改变与屏障功能损伤密切相关。冷冻电镜单颗粒分析揭示，E-cadherin胞外域在钙离子存在下形成严格间距为25 nm的"分子拉链"结构，这种超分子组装体的稳定性直接依赖于单个E-cadherin蛋白分子量的结构完整性。

 

常见问题：

 

Q1. 为什么在非还原性SDS-PAGE中E-cadherin蛋白分子量检测结果与理论值存在显著差异？

A：这主要源于E-cadherin含有12个保守的二硫键（主要在EC1-EC2结构域），在非还原条件下维持部分折叠构象，导致电泳迁移率降低。此外，其高度糖基化（约含30%糖链质量）也会增加表观分子量。jīngquè测定需采用还原剂处理并结合糖苷酶消化。

 

Q2. E-cadherin蛋白分子量在不同物种间是否存在显著变异？

A：哺乳动物E-cadherin蛋白分子量高度保守，人（UniProt P12830）、小鼠（P09803）和大鼠（P10287）均为120 kDa。但低等脊椎动物如斑马鱼存在两种E-cadherin亚型（约115 kDa和125 kDa），而无脊椎动物果蝇的DE-cadherin分子量较大（约175 kDa），因其含有额外的结构域重复。