Stemcell CryoStor® CS10细胞冻存液10

 

名称	品牌	货号	规格	保存	包含
CryoStor® CS10 细胞冻存液 CryoStor® CS10 Cell Freezing Medium	Stemcell	100-1061	100mL	2~8℃	10% DMSO

 

一、产品概述

CryoStor®CS10是一款独特配方的无血清、无动物成分且成分明确的冷冻保存培养基，含有10%二甲基亚砜（DMSO）。该产品专为低温环境(-70至-196°C）下的细胞保存而设计，在冷冻、储存及解冻过程中为细胞和组织提供安全保护环境。CryoStor®CS10适用于肝细胞、组织样本、血液来源细胞、CHO细胞、骨髓瘤细胞系、杂交瘤、人类间充质干细胞、人类胚胎干细胞（ES）和诱导多能干细胞（iPS细胞）等极度敏感细胞类型的冷冻保存。

 

二、产品优势

1. 开盖即用

2. 不含血清和蛋白

3. 不含动物源成份

4. 采用USP级／最高质量组件生产的cGMP

5. 不含内毒素

6. 细胞存活率和复苏率高

数据图标

图1. 在CryoStor®CS10中冷冻保存的免疫细胞解冻后具有稳定高存活率

CryoStor®CS10能有效减轻温度诱导的细胞分子应激反应，从而最大化多种免疫细胞（包括T细胞，数据未显示）和B细胞解冻后的存活率与回收率。如图所示，6名不同供体的人B细胞在CryoStor®CS10中冷冻保存后，经碘化丙啶染色检测显示解冻后存活率稳定保持高水平（94.3%-97.9%）。

 

*对照品低于检测限。

图2. 在CryoStor®CS10中冷冻保存的免疫细胞解冻后保持功能性

(A) 将冷冻保存在CryoStor®CS10中的人外周血泛T细胞解冻后，在添加/不添加T细胞活化因子的条件下进行培养。供体1-3的细胞在含10%胎牛血清的RPMI培养基中培养24小时，实验组添加40 ng/mL PMA和1 μg/mL离子霉素（活化组），对照组不添加。供体4-5的细胞在ImmunoCult™-XF T细胞扩增培养基（货号#10981）中培养48小时，实验组添加ImmunoCult™人CD3/CD28 T细胞活化剂（货号#10971），对照组不添加。收集培养上清液后，使用人IL-2 ELISA试剂盒（货号#02006）测定分泌的细胞因子浓度。无论是PMA/离子霉素还是ImmunoCult™人CD3/CD28 T细胞活化剂的刺激，均能促使IL-2分泌量较未刺激的对照组显著增加。

(B) 将冷冻保存在CryoStor®CS10中的人B细胞（供体6-11）解冻后，用1 µg/mL CD40和100 ng/mL IL-21刺激培养7天。收集培养上清液，使用人IgG ELISA抗体配对试剂盒（货号#01994）检测免疫球蛋白G（IgG）的分泌量。与未刺激的对照组相比，B细胞活化显著提高了IgG的分泌水平。

 

三、成分说明

· 主要冷冻保护剂：10% DMSO（低毒性，快速渗透细胞，抑制冰晶生长）。

· 基础培养基：含无机盐、氨基酸及维生素，维持细胞生理环境稳定。

· 胶体保护剂：高分子量聚合物（如羟乙基淀粉），提供细胞外渗透压支持，减少细胞皱缩。

· 缓冲系统：HEPES与碳酸氢盐复合缓冲，维持pH 7.2-7.4（4℃至-196℃范围内稳定）。

 

四、适用细胞类型

· 干细胞：胚胎干细胞（ESC）、诱导多能干细胞（iPSC）、间充质干细胞（MSC）、造血干细胞（HSC）等。

· 原代细胞：成纤维细胞、上皮细胞、神经元细胞、免疫细胞（如T细胞、NK细胞）。

· 敏感细胞系：CHO、HEK293、杂交瘤细胞等。

 

五、操作／使用说明

（1）冷冻保存细胞

1. 打开前，用70%乙醇或异丙醇擦拭CryoStor®CS10容器的外部。

2. 使用细胞特异性方案获得细胞悬液，并离心细胞以获得细胞沉淀。

3. 用移液管小心地移除上清液，留下少量培养基以确保细胞沉淀不受干扰。轻轻甩动试管，使细胞沉淀重新悬浮。

4. 加入低温（2-8°C）CryoStor®CS10，充分混合，然后将悬液转移至冷冻管中。

5. 将细胞在2-8°C下孵育10分钟。

6. 使用标准慢速速率控制冷却方案（约-1°C/分钟）或异丙醇冷冻容器对细胞进行冷冻保存，并在液氮温度（-135°C）下储存。

注：不建议在-80°C下长期储存。

 

（2）解冻细胞

1. 在37°C水浴中选择温热介质。

2. 用70%乙醇或异丙醇擦拭细胞瓶外壁。

3. 在生物安全柜中，将盖子旋转四分之一圈以释放内部压力，然后重新拧紧。

4. 将细胞瓶轻轻摇晃，快速置于37°C水浴中解冻，切勿将细胞瓶浸入水中。当仅残留少量冷冻细胞沉淀时取出细胞瓶。切勿涡旋细胞。

5. 用70%乙醇或异丙醇擦拭瓶外壁。

6. 用温热的培养基将细胞按1：1稀释。

7. 在室温（15-25°C）下以300 x g离心细胞悬液10分钟。

8. 用移液管小心地移除上清液，留下少量培养基以确保细胞沉淀不受干扰。

轻轻甩动试管，使细胞沉淀重新悬浮。

9. 轻轻向试管中加入培养基。

 

六、储存与稳定性

· 储存条件：2-8℃避光保存，未开封产品保质期24个月；开封后建议2周内使用完毕，避免反复冻融。

· 运输条件：冰袋运输（2-8℃），避免极端温度波动。

 

七、注意事项

· 操作时需佩戴手套及护目镜，避免DMSO直接接触皮肤或黏膜。

· 产品不含抗生素，建议在无菌环境下操作，确保细胞无污染。

· 不同细胞类型最佳冻存浓度可能存在差异，建议通过预实验优化条件。

 

八、质量控制标准

· 无菌性：通过0.22μm滤膜过滤除菌，无细菌、真菌、支原体及内毒素（<0.1 EU/mL）。

· 细胞活性验证：人骨髓MSC复苏率≥85%，连续传代3次后仍保持多向分化潜能（成脂、成骨、成软骨分化阳性）。

· 批次一致性：每批次进行pH、渗透压（280-320 mOsm/kg）及无菌性检测，确保性能稳定。

 

九、安全信息

· 本产品仅供科研使用，不可用于临床诊断或治疗。

· 废弃物处理需遵循当地生物安全法规，DMSO废液需分类收集处理。

（注：具体操作细节及批次信息请以产品说明书及质检报告为准。）