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北京百泰派克生物科技有限公司
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什么是载体蛋白磷酸化
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载体蛋白磷酸化的分子机制与生物学意义
载体蛋白磷酸化是细胞信号转导过程中关键的翻译后修饰方式,指在激酶催化下将磷酸基团共价结合到载体蛋白特定氨基酸残基(如sīānsuān、sūānsuān或làoānsuān)的过程。这一修饰通过改变载体蛋白的构象、活性或相互作用能力,jīngquè调控营养物质、离子及代谢产物的跨膜转运效率。从分子机制来看,载体蛋白磷酸化通常由上游信号通路(如AMPK、PKA或胰岛素受体激酶途径)触发,磷酸化位点多位于载体蛋白的胞质结构域,其动力学特征遵循米氏方程,zuì大反应速率(Vmax)和米氏常数(Km)受ATP浓度、激酶/磷酸酶平衡状态的影响。例如,葡萄糖转运体GLUT4的Ser488位点磷酸化会诱导其从细胞内囊泡向质膜转位,显著提升细胞对葡萄糖的摄取能力;而钠钾泵(Na+/K+-ATPase)的磷酸化则通过调节α亚基的构象变化,改变离子转运的亲和力与循环速率。
在病理生理层面,载体蛋白磷酸化的异常与多种疾病密切相关。Ⅱ型糖尿病患者骨骼肌中GLUT4磷酸化水平降低,导致胰岛素信号通路下游的膜转位障碍;囊性纤维化跨膜传导调节因子(CFTR)的磷酸化缺陷则会引发氯离子通道功能丧失。实验研究中,检测载体蛋白磷酸化需结合磷酸化特异性抗体、质谱分析或放射性同位素标记法,具体费用需要根据实验需求和样品情况来确定。值得注意的是,不同磷酸化位点可能产生拮抗效应:如神经递质转运体SERT的Thr276磷酸化促进其内化,而Ser573磷酸化则增强膜稳定性,这种位点特异性调控体现了信号网络的复杂性。
常见问题:
Q1. 载体蛋白磷酸化与可逆性蛋白磷酸化的区别是什么?
A:载体蛋白磷酸化专指发生在膜转运蛋白上的磷酸化事件,其功能直接关联物质跨膜运输的调控;而广义蛋白磷酸化涵盖所有dànbáizhì(如转录因子、酶等),生物学效应更为多样。载体蛋白磷酸化通常具有更严格的时空特异性,例如突触小泡转运体的磷酸化仅在神经递质释放时被瞬时激活。
Q2. 如何验证某个载体蛋白的磷酸化是否具有功能意义?
A:需构建该位点的磷酸化模拟(如天冬氨酸突变)和非磷酸化突变体(如bǐngānsuān突变),通过比较两者在膜定位、转运活性或蛋白相互作用的差异。例如线粒体ADP/ATP载体蛋白(ANT1)的Tyr194磷酸化突变体可通过荧光共振能量转移(FRET)检测其构象变化与核苷酸转运效率的相关性。
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文献和实验feroger 看了很多文献上测p-Rb,用的是actin做的内参,没用总的Rb,这是为什么呢 kern6549 怎么能用总的Rb作为内参,看来你没有弄明白什么是内参! feroger 测磷酸化不是要和总的对照吗?像测p-AKT还要同时测总AKT,为什么很多文献上测p-Rb,而不测总的Rb呢? kern6549 为什么一定要和总的对照呢? 测磷酸化
就变得蛮复杂的。 什么是危险因子?以老人痴呆症为例,如果某人身上拥有叫做 apoE(载体蛋白E)脂蛋白的基因型有异常时,60 岁以后会得到这种病的机率是蛮高的,也就是说,这种人活到 80 岁时,其中有 40% 会产生老人痴呆,但是正常人如果没有这样的基因的话,大概只有 5% 的比率会产生痴呆,这就是一种危险因子的概念。但是这种检查可能还不是很成熟的,也就是说它会增加你的危险性。但是如果一个人的脑袋有点问题,他到底是得到杭廷顿氏症还是老人痴呆,你可不可以用这个基因来做检测?答案是不可
下,其无活性的单体与有活性的多聚体(由10?0个单体呈线状排列)之间可以互变。柠檬酸与异柠檬酸可促进单体聚合成多聚体,增强酶活性,而长链脂肪酸可加速解聚,从而抑制该酶活性。乙酰CoA羧化酶还可通过依赖于cAMP的磷酸化及去磷酸化修饰来调节酶活性。此酶经磷酸化后活性丧失,如胰高血糖素及肾上腺素等能促进这种磷酸化作用,从而抑制脂肪酸合成;而胰岛素则能促进酶的去磷酸化作用,故可增强乙酰CoA羧化酶活性,加速脂肪酸合成。 同时乙酰CoA羧化酶也是诱导酶,长期高糖低脂饮食能诱导此酶生成,促进脂肪酸合成
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