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- 摩莱
- MG59002
- 2025年08月01日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
北京德航五洲生物科技有限公司
- 规格：
500G
培养基背景拓展
培养基：是指供给微生物、植物或动物（或组织）生长繁殖的，由不同营养物质组合配制而成的营养基质。通过在体外模拟细胞的生长环境，培养基可以为细胞生长提供合适的pH、渗透压以及各种营养物质。目前，培养基广泛应用于重组蛋白/抗体药物、疫苗、基因治疗/细胞治疗药物等生物制品生产及科研机构研发，是生物医药行业发展的基石，对生物医药行业的发展起着至关重要的作用。LB液体培养基介绍LB液体培养基/LB肉汤是最经典的细菌培养基。本品是预混好的粉末，按照胰蛋白胨：酵母提取物：氯化钠（比例是2：1：2）预混好，采用的是国产原料，以保持产品的批间一致性，采用三维预混机充分摇匀并分装至袋装，以最大限度解放科研人员的劳动时间。本品是实验室中广泛使用的普通培养基，用来培养大肠杆菌，表达大量的外源蛋白。在基因工程、分子生物学中使用比较多。
产品成分：胰蛋白胨5g/500 mL、酵母提取物2.5g/500 mL、氯化钠5g/500 mL。
使用方法：
1、每袋LB液体培养基在去离子水中充分溶解，定容至500 mL，121℃高压灭菌15~20min。
2、根据需求加入合适的抗生素。
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文献和实验4．操作步骤 1）大肠杆菌感受态细胞的制备(CaCl2法) (1) 从新活化的E.coli DH5α菌平板上挑取一单菌落，接种于3～5ml LB液体培养中，37℃振荡培养12h左右，直至对数生长期。将该菌悬液以1:100～1:50转接于100ml LB液体培养基中，37℃振荡扩大培养，当培养液开始出现混浊后，每隔20～30min测一次OD600nm，至OD600nm≤0.5时停止培养；(2) 每组取培养液3个2ml转入2ml离心管中，在冰上冷却20-30min，于4℃，4000r／
细胞来说要少很多。 最后，针对细胞上清液的外泌体的提取。这个是老生常谈的问题，这里就不再多讲了。如果实验室有超速离心机的话，那就使用超速离心的方法，按照前文建议的预处理操作后，超离后的沉淀也会增加的，同时外泌体的质量也会提升。如果实验室没有超离的情况下，也可以通过试剂盒的方法来提取，除了进口品牌外，也可以使用一些国产试剂盒，质量也不亚于进口品牌的。 总结一下，为了获得高质量的外泌体：需要在细胞培养时减少正常血清的使用，推荐去外泌体血清或者外泌体专用无血清培养基；收获
种到新瓶子之前最好充分吹打，把细胞弄匀，否则传的细胞也呈现聚集的团，很难看。我的经验是消化液用EDTA加比较稀的胰酶，这样消化的细胞比较容易成单细胞悬液。 丁香园sir123的观点： 我目前已经养PC12一个多月了，经验谈不上很多，不过失败的教训倒是不少，可以拿出来和大家分享一下 1.细胞的培养基，我开始用10％FBS国产四季清的，DMEM，没加马血清和多聚赖氨酸什么的，因为条件关系，结果细胞贴壁性很好，生长速度还可以，3天1：2传代，在传到第5代时候，观察细胞状态下降，正常
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