半包埋腊叶标本怎么制作

半包埋腊叶标本制作技术与方法

 

半包埋腊叶标本是一种将植物样本部分包埋在石蜡中的标本制作方法，既能保持样本的形态特征，又能实现长期保存。该方法适用于需要观察植物表面结构（如气孔、表皮毛等）的形态学研究，同时兼顾样本的稳定性。制作过程主要包括样本预处理、脱水、透明化、浸蜡、包埋、切片及封片等步骤。

 

首先，选择新鲜且完整的植物叶片或其他组织作为样本，避免损伤或病变部位。样本采集后需立即进行固定，通常使用 FAA（福尔马林-乙酸-酒精）固定液，固定时间视样本大小而定，一般为 24-48 小时。固定完成后，样本需经过梯度酒精脱水（如 30%、50%、70%、85%、95% 和 100% 酒精），每级浸泡 1-2 小时，确保水分被chèdǐ置换。脱水后的样本需进行透明化处理，常用二甲苯或氯仿作为透明剂，使样本呈现半透明状态，便于后续浸蜡。

 

浸蜡是半包埋腊叶标本制作的关键步骤。将透明化后的样本置于熔化的石蜡（熔点为 56-58℃）中，分两次浸渍，每次 1-2 小时，确保石蜡充分渗透组织。浸蜡完成后，将样本置于包埋盒中，倒入适量石蜡，使其部分包埋，即仅覆盖样本的一部分，另一部分暴露在外。待石蜡凝固后，使用切片机对包埋部分进行切片（厚度通常为 8-12 μm），以便后续显微观察。

 

切片完成后，需进行展片和贴片处理。将切片置于温水（40-45℃）中展平，再用载玻片捞取，烘干后即可进行染色（如苏mùjīng-伊红染色）或直接封片。封片时，可使用中性树胶或加拿大胶，确保样本长期保存。具体费用需要根据实验需求和样品情况来确定。

 

半包埋腊叶标本的优势在于既能保留样本的自然形态，又能提供清晰的显微结构，适用于植物分类学、解剖学及病理学研究。该方法的关键在于控制脱水、透明化和浸蜡的时间，避免样本收缩或变形。

 

常见问题：

 

Q1. 半包埋腊叶标本制作过程中，如何避免样本收缩或变形？

A：样本收缩或变形通常由脱水或透明化时间过长导致。建议严格控制梯度酒精脱水时间，并在透明化阶段使用温和的透明剂（如叔丁醇），以减少组织损伤。此外，浸蜡温度不宜过高，避免石蜡过度渗透造成样本硬化。

 

Q2. 半包埋腊叶标本是否适用于含水率较高的植物组织？

A：含水率高的组织（如肉质叶片或藻类）需延长脱水时间，并在酒精梯度中增加过渡浓度（如 30%-50%-70%-85%-95%-100%），以避免脱水不均导致样本破裂。透明化阶段可采用逐步替换法，先用低浓度透明剂（如 50% 二甲苯）处理，再逐步提高浓度。